Непосредственно ЭКО проводится врачами-эмбриологами в условиях эмбриологической лаборатории. Собственно оплодотворение проводят одним из двух способов:

1) инсеминация in vitro;

2) интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ICSI, ИКСИ).

При первом, более простом способе к яйцеклеткам, которые находятся в питательной среде, добавляют суспензиюсперматозоидов. Сперматозоиды добавляют из расчета 100--200 тыс. на одну яйцеклетку. В течение 2--3 часов один из сперматозоидов проникает в яйцеклетку и тем самым оплодотворяет её. При втором способе (ИКСИ) сперматозоид вводят в яйцеклетку «вручную» с помощью микрохирургических инструментов. ИКСИ используют при очень плохом качестве спермы, когда оплодотворение не может быть получено даже в чашке.

После проникновения сперматозоида яйцеклетка считается эмбрионом. Вероятность успешного оплодотворения 60--70%. Эмбрионы содержат в искусственных условиях от 2 до 6 дней. Для этого используют так называемые СО 2 -инкубаторы -- шкафы, в которых поддерживается температура 37°C и содержание СО 2 в атмосфере 5--6%. Эмбрионы (а до этого яйцеклетки) в инкубаторах непосредственно содержат в пластиковых чашках (чашки Петри, чашки Нунка, планшеты и пр.) с культуральной средой. В культуральную среду для эмбрионов входят основные физиологические ионы (Na + , K + , Ca 2+ , Mg 2+ , C l- , CO 3- и т. д.), энергетические субстраты (глюкоза, пируват, лактат), аминокислоты, часто витамины и белки сыворотки крови. За время инкубации эмбрион человека практически не увеличивается в размере (первые 4 дня его размер 0,1 мм, на 5 день 0,15--0,2 мм), но количество клеток, его составляющих, возрастает многократно (1 день -- 1 клетка; 2 день -- 4 клетки; 3 день -- 8 клеток; 4 день -- от 10 до 20 клеток, 5 день -- от 40 до 200 клеток). Перенос эмбриона в матку осуществляют через 2--5 дней после оплодотворения яйцеклетки. Процедура не требует анестезии (обезболивания) и выполняется на гинекологическом кресле в течение нескольких минут. Эмбрион переносят в матку, проводя через шейку матки специальный эластичный катетер. Согласно приказу № 67 Минздрава РФ в полость матки не рекомендуется переносить более 4 эмбрионов, чтобы избежать многоплодной беременности. Современная практика ЭКО в России такова, что обычно осуществляют перенос 2 эмбрионов. При невозможности вынашивания плода пациентка может прибегнуть к использованию суррогатной матери.

Заключение

На сегодняшний день в клиниках замораживают (криоконсервируют) половые клетки человека (сперматозоиды, ооциты), и эмбрионы на различных стадиях развития, полученных в результате программ ЭКО. Замораживают оставшиеся после переноса в «свежем» (то есть, стимулированном) цикле эмбрионы только хорошего качества, т.к. впоследствии они благополучно перенесут разморозку.

Замораживание спермы применяют в случаях: раковых заболеваний у мужчин с целью обеспечения запасов спермы до начала химиотерапии и последующего использования замороженного образца для получения здорового потомства, неуверенности наличия партнера во время сбора спермы для ЭКО -- ситуация, характерная для иногородних пациентов, донорства, в случаях планированного отложенного отцовства. Возможно, в связи с заметным снижением мужской фертильности, запасание впрок спермы молодых мужчин будет популяризироваться.

Замораживание яйцеклеток применяют в случаях, когда стимуляция не рекомендуется или противопоказана (например, онкологические и др. заболевания) или же невозможно провести оплодотворение клеток в данный период. Зрелый ооцит (женская клетка) крайне хрупкий из-за большого размера, жидкого содержимого и расположения хромосом и во время процедур замораживания/размораживания легко повреждается. Частота родов после оплодотворения и инсеминации замороженных-размороженных ооцитов составляет 3-4%. С помощью криоконсервации решается проблема зачатия и бесплодия. Кроме лечения многих форм мужского и женского бесплодия, ВРТ используются и для решения проблем фундаментальной биологии и медицины. Используя не затребованные для имплантации эмбрионы, изучают механизмы оплодотворения и развития эмбриона, генетическую регуляцию эмбриогенеза, возможности преимплантационной диагностики наследственных заболеваний и другие проблемы. Сперму пациент получает самостоятельно с помощью мастурбации. Возможно использование прерванного коитуса, либо медицинского презерватива без смазки. В случае невозможности получения спермы путем эякуляции, используют хирургические методы: аспирация содержимого эпидидимиса, биопсия яичка и прочее. Сперму получают в день пункции фолликулов супруги. Если получение спермы в день пункции невозможно, то используют предварительное получение спермы с последующим замораживанием и хранением в жидком азоте. Перед оплодотворением яйцеклетки сперматозоиды отмывают от семенной жидкости и с помощью специальных методов выделяют наиболее качественные из них.

При невозможности использования спермы мужа или при отсутствии у пациентки полового партнёра, возможно использование спермы донора. Использование спермы донора производится при обязательном письменном согласии супруга и регламентируется приказом N107Н Минздрава РФ. Согласно этому приказу сперма донора используется после 6-тимесячного карантина, т.е. через 6 месяцев хранения в замороженном состоянии и повторного обследования донора, подтверждающего отсутствие инфекционных заболеваний.

Экстракорпоральное оплодотворение - сравнительно молодой метод лечения бесплодия. Впервые он был применён в Англии в 1978 году. Однако еще 200 лет назад предпринимались подобные попытки.

Суть ЭКО (экстракорпорального оплодотворения) : сперматозоиды встречаются с яйцеклетками в пробирке, а затем их подсаживают в матку бесплодной женщины или суррогатной матери. При благоприятном исходе процедуры (наступлении беременности), часты случаи, когда оплодотворение из пробирки приводит к многоплодной беременности: зачинается двойня или тройня, т.к. в попытке экстракорпорального оплодотворения принимают участие несколько яйцеклеток. По желанию женщины может производиться редукция (изъятие лишних зародышей), но бывает, что это приводит к гибели оставшихся и к последующему выкидышу.

Успех процедуры ЭКО составляет примерно 30-35%.

Когда применяется ЭКО (экстракорпоральное оплодотворение) ?

ЭКО содействие эффективно при тех формах бесплодия, когда устранить причину, препятствующую зачатию не удается. Например, после внематочных беременностей, когда удалены одна или обе маточные трубы; после воспалительных заболеваний, когда проходимость маточных труб нарушена и восстановить её не представляется возможности.

В случаях, когда спермы недостаточно или когда в ней мало сперматозоидов врачами андрологами разработаны способы получения спермы искусственным путём с помощью пункции или операции. При мужском факторе бесплодия не требуется обязательно выполнять зачатие с помощью ЭКО, можно просто ввести полученную искусственным путём сперму в полость матки. Однако, учитывая, что такой способ получения сперматозоидов сложен, в данном случае использование процедуры ЭКО дает больше шансов на успех.

Как часто применяется ЭКО?

К сожалению, процедура ЭКО применяется нечасто. Причин тому много:

• во-первых, этот метод лечения дорог и не входит в программы ОМС, значит доступен далеко не всем пациентам;
• во-вторых, центры ЭКО мало субсидируются государством и их можно найти только в крупных городах.

Обследование

Если бесплодная пара обратилась в один из центров ЭКО (экстракорпорального оплодотворения) по лечению бесплодия, то первым этапом станет обследование обоих партнёров. Женщине обычно выполняется УЗИ, анализы крови на гормоны, анализы на СПИД, гепатит, сифилис. Мужчине - спермограмма. При необходимости проводятся генетические анализы. Обследование занимает в среднем 2 недели. После обследования принимается решение, какой метод лечения бесплодия показан каждой конкретной паре.

Гормональные препараты

Перед проведением зачатия с помощью ЭКО женщине назначают специальные гормональные препараты, которые стимулируют рост и созревание не одного-двух (как при обычном цикле), а нескольких фолликулов. Это необходимо, так как для проведения процедуры ЭКО нужно иметь некоторый запас эмбрионов. Женщина сама ежедневно делает себе инъекции гормональных препаратов. Продолжительность гормонального лечения составляет в среднем 2 недели.

Затем женщине производится пункция фолликулов. Процедура проводится амбулаторно. Иглой через влагалище под контролем УЗИ созревшие фолликулы извлекаются из яичников. Таким образом, получают несколько яйцеклеток. Эта процедура малотравматична и осложнения после нее маловероятны.

Получение спермы

Если мужчина здоров - трудностей с получением нужного количества спермы обычно не бывает. В тех случаях, когда сперматогенез нарушен, мужчина нуждается в специальном лечении.

Бывают ситуации, когда сперма вырабатывается, но получить её естественным путём не представляется возможным. Тогда врач выполняет пункцию. Эта манипуляция проводится под наркозом. Существует возможность оплодотворения яйцеклетки одним-единственным сперматозоидом.

Экстракорпоральное оплодотворение

Непосредственно зачатие посредством ЭКО проводится врачами-эмбриологами в условиях эмбриологической лаборатории. С применением современной аппаратуры в специальных растворах проводится соединение сперматозоида и яйцеклетки. Через 2-4 дня эмбрионы готовы для следующего этапа.

Предимплантационная диагностика

Предимплантационная диагностика - это метод исследования эмбриона, полученного в результате ЭКО, перед его переносом в матку. С помощью современных генетических технологий можно обследовать эмбрион, состоящий всего из 4-8 клеток. С помощью этого метода диагностики выявляются грубые пороки развития эмбриона и наследственные хромосомные болезни, такие как болезнь Дауна, гемофилия и др. Кроме того, с помощью предимплатационной диагностики можно определить пол будущего ребёнка.

Перенос эмбрионов в матку

Перенос эмбрионов в матку - самая простая процедура из всего метода. С помощью специального эластичного катетера 2-3 оплодотворенные яйцеклетки переносят в полость матки. Для этого не требуется обезболивания.

После переноса яйцеклеток женщина может идти домой, на работу. Никакого специального режима не требуется. Тем не менее, в некоторых центрах ЭКО выдаются больничные листы. Естественно, после процедуры женщинам не рекомендуются большие физические и эмоциональные нагрузки.

Беременность

Беременность при ЭКО наступает в 30-35% случаев. Из 20 наступивших беременностей родами заканчиваются в среднем 18. После введения эмбрионов один раз в три дня нужно контролировать уровень гормонов в крови. Через 12 дней выполняется тест на беременность. В случае многоплодной беременности по желанию женщины выполняют редукцию - удаление «лишних» эмбрионов.

Роды

Роды при беременности после ЭКО ничем не отличаются от обычных. В тех случаях когда причина бесплодия - болезнь женщины, роды проводятся с учётом конкретной болезни. К способу оплодотворения это уже не имеет никакого отношения.

Дети

По мнению врачей, оплодотворение из пробирки никак не сказывается на будущем ребенке и он ничем не отличается от остальных детей, рожденных естественным путем. Тем не менее, есть мнение, что такие дети лучше учатся, но чаще болеют. Врачи считают, что это может быть связано с чрезмерной опекой желанного ребёнка.

Количество попыток ЭКО

Как известно, беременность наступает лишь в 30-35% попыток искусственного оплодотворения. Возникает вопрос: как быть тем 70 из 100 женщин, у которых не наступила беременность? Сколько раз можно предпринимать попытки ЭКО?

В каждом отдельном случае этот вопрос решается индивидуально. Сама процедура ЭКО достаточно безопасна и может повторяться много раз. У некоторых пар беременность наступает с 8-10 попытки. Разумный предел количества процедур есть, он определяется врачом в зависимости от конкретной ситуации. При повторных попытках возможно использование эмбрионов, не использованных в предыдущий раз. К сожалению, гарантии наступления беременности при ЭКО никто дать не может.

Донорство яйцеклеток

При пункции фолликулов может быть получено большее, чем необходимо количество яйцеклеток. В этих случаях здоровым женщинам предлагают стать донорами. Их яйцеклетки будут использованы в тех случаях, когда у пациентки нет своих яйцеклеток - после удаления яичников, в менопаузе, при изменённых яичниках и др.

Для того, чтобы поощрять донорство, женщина, согласившаяся отдать свои яйцеклетки, меньше платит за попытку ЭКО. Естественно, донорство яйцеклеток анонимно, у донора нет никаких прав на ребёнка, родившегося из её яйцеклетки.

Донорские яйцеклетки оплодотворяются спермой мужа той женщины, которой они имплантируются. В этом случае гормональная подготовка к ЭКО не требуется. В большинстве центров ЭКО лишние оплодотворённые и неоплодотворённые эмбрионы сохраняются в замороженном состоянии в независимости от того, будут они использованы у других женщин или нет. Срок хранения определён в 55 лет.

ЭКО в менопаузе и у женщин с удалёнными яичниками

Наступление беременности и её успешное вынашивание возможно практически во всех случаях, когда у женщины есть матка.

Пациентки в возрасте 40-50 лет тоже могут иметь детей. Обычно женщины такого возраста обращаются к ЭКО вынужденно - в случае, если погиб ребенок, при поздних браках и так далее. Если беременность не противопоказана женщине по состоянию здоровья, то метод ЭКО может применяться.

Течение первого триместра беременности обычно сопровождается заместительной гормональной терапией, затем она отменяется и беременность протекает самостоятельно.

Осложнения при ЭКО

Основное осложнение, с которым сталкиваются врачи - это многоплодная беременность. Кроме того, иногда после редукции эмбрионов может развиться выкидыш. Осложнением гормональной терапии, проводящейся перед ЭКО, может стать синдром гиперстимуляции яичников. Он проявляется болями в животе, вздутием живота. При его своевременной диагностике поддаётся коррекции. Важно при появлении каких-либо неприятных ощущений во время гормональной терапии сразу обратиться к врачу. Внематочная беременность при ЭКО встречается редко.

6. Оборудование пункта искусственного осеменения коров

7. Организация работы пункта искусственного осеменения. Выявление коров в охоте

8. Преимущества искусственного осеменения животных

9. Выращивание самцов-производителей для использования в искусственном осеменении. Особенности кормления и содержания

10. Искусственная вагина. Особенности устройства вагин для самцов разных видов

11. Устройство и подготовка к использованию искусственной вагины

12. Особенности взятия спермы у самцов разных видов

13. Взятие спермы у быка

14. Взятие спермы у жеребца, хряка

16. Добавочные половые железы, их значение

17. Сперма, ее химический состав, свойства

18. Сперма. Строение сперматозоида

19. Сперма. Свойства сперматозоидов

20. Спермоагглютинация, ее причины и профилактика

21. Дыхание и гликолиз сперматозоидов

24. Разбавление спермы. Разбавители. Преимущества разбавления спермы

25. Виды разбавителей спермы, их химический состав и свойства

26. Криоконсервация спермы. Краткая история и значение метода

27. Криоконсервация спермы. Методика криоконсервации

28. Влияние паратипических факторов на воспроизводительную функцию самок

29. Влияние генетических факторов на воспроизводительную функцию самок

30. Стимуляция половой функции самок

31. Синхронизация половой функции самок

32. Оплодотворение яйцеклеток вне организма животного (in vitro)

34. Оплодотворение яйцеклеток вне организма животного (in vitro). Капацитация сперматозоидов

36. Маноцервикальный метод осеменения коров. Достоинства и недостатки

37. Визоцервикальный метод осеменения коров. Достоинства и недостатки

39. Сперматогенез

40. Искусственное осеменение овец и коз

41. Искусственное осеменение свиней

42. Биотехнология нативной спермы. Оценка сперматозоидов по морфологическим признакам

43. Методика замораживания спермы и хранения ее в жидком азоте

44. Искусственное осеменение птиц

45. Оборудование лаборатории для искусственного осеменения пчел. Взятие спермы у трутня. Осеменение матки

47. Овогенез.

48. Ректоцервикальный метод осеменения коров. Достоинства и недостатки

49. Искусственное осеменение самок северных оленей (важенок)

50. Оттаивание и оценка качества размороженной спермы

51. Естественное осеменение у пчел

52. Искусственное осеменение пчелиных маток

53. Визуальная и микроскопическая оценка спермы. Методика исследований

54. Воздействие на сперматозоиды высокой и низкой температур, йода.Методика исследований

55. Виды патологических форм сперматозоидов. Соотношение нормальных и патологических форм

56. Искусственное осеменение кобыл

57. Оценка концентрации и активности (подвижности) сперматозоидов

58. Воздействие на сперматозоиды осмотического давления (гипотонический и гипертонический растворы). Методика исследований

59. Организация искусственного осеменения

32. Оплодотворение яйцеклеток вне организма животного (in vitro)

Положительное значение - несмотря на низкий выход ооцитов, при каждом извлечении возможность многократного использования животного.

33. Особенности оплодотворения яйцеклеток in vitro у самок разных видов с.-х. животных

Разработка системы оплодотворения и обеспечения ранних стадий развития эмбрионов млекопитающих вне организма животного (in vitro) имеет огромное значение в решении ряда научных задач и практических вопросов, направленных на повышение эффективности разведения животных.

Для этих целей необходимы эмбрионы на ранних стадиях развития, которые можно извлечь только хирургическими методами из яйцеводов, что является трудоемким и не дает достаточного числа зародышей для проведения этой работы.

Оплодотворение яйцеклеток млекопитающих in vitro включает следующие основные этапы: созревание ооцитов, капацитацию сперматозоидов, оплодотворение и обеспечение ранних стадий развития.

Созревание ооцитов in vitro. Большое число половых клеток в яичниках млекопитающих, в частности у крупного рогатого скота, овец и свиней с высоким генетическим потенциалом, представляет источник огромного потенциала воспроизводительной способности этих животных в ускорении генетического прогресса по сравнению с использованием возможностей нормальной овуляции. У этих видов животных, как и других млекопитающих, число ооцитов, овулирующих спонтанно во время охоты, составляет только незначительную часть от тысяч ооцитов, находящихся в яичнике при рождении животного. Остальные ооциты регенерируют внутри яичника или, как говорят обычно, подвергаются атрезии. Естественно возникал вопрос, нельзя ли выделить ооциты из яичников путем соответствующей обработки и провести их дальнейшее оплодотворение вне организма животного. В настоящее время не разработаны методы использования всего запаса ооцитов в яичниках животных, но значительное число ооцитов может быть получено из полостных фолликулов для дальнейшего их созревания и оплодотворения вне организма.

В настоящее время применение на практике нашло созревание in vitro только ооцитов крупного рогатого скота. Ооциты получают из яичников коров после убоя животных и путем прижизненного извлечения, 1-2 раза в неделю. В первом случае яичники берут от животных после убоя, доставляют в лабораторию в термостатированном контейнере в течение 1,5-2,0 ч. В лаборатории яичники дважды промывают свежим фосфатным буфером. Ооциты извлекают из фолликулов, диаметр которых 2-6 мм, путем отсасывания или разрезания яичника на пластинки. Ооциты собирают в среду ТСМ 199 с добавлением 10 % сыворотки крови от коровы в охоте, затем дважды промывают и отбирают для дальнейшего созревания in vitro только ооциты с компактным кумулюсом и однородной цитоплазмой.

В последнее время разработан способ прижизненного извлечения ооцитов из яичников коров с помощью ультразвукового прибора или лапароскопа. При этом ооциты отсасывают из фолликулов, диаметр которых не менее 2 мм, 1-2 раза в неделю от одного и того же животного. В среднем получают однократно 5-6 ооцитов на животное. Менее 50 % ооцитов пригодны для созревания in vitro.

Положительное значение - несмотря на низкий выход ооцитов, при каждом извлечении возможность многократного использования животного. Капацитация сперматозоидов. Важным этапом в разработке метода оплодотворения у млекопитающих было открытие явления капацитации спермиев. В 1951 г. М.К. Чанг и одновременно с ним Г.Р. Аустин установили, что оплодотворение у млекопитающих наступает только в том случае, если спермин в течение нескольких часов до овуляции находятся в яйцеводе животного. Основываясь на наблюдениях по изучению проникновения спермиев яйцеклетки крысы в различные сроки после спаривания Аустин ввел термин капацитации. Он означает, что в спермин должны произойти некоторые физиологические изменения до того, как сперматозоид приобретет способность к оплодотворению.

Разработано несколько методов капацитации эякулированных спермиев домашних животных. Для удаления белков с поверхности спермиев, которые, по-видимому, тормозят капацитацию спермиев, была использована среда с высокой ионной силой.

Однако наибольшее признание получил способ капацитации сперматозоидов с использованием гепарина (Дж. Парриш и др., 1985). Пайеты с замороженным семенем быка оттаивают в водяной бане при 39°С в течение 30-40 с. Примерно 250 мкл оттаянного семени подслаивают под 1 мл среды для капацитации. Среда для капацитации состоит из модифицированной среды Тиройда, без ионов кальция. После инкубации в течение одного часа верхний слой среды объемом 0,5-0,8 мл, содержащий большинство подвижных сперматозоидов, удаляют из пробирки и промывают дважды центрифугированием при 500 g в течение 7-10 мин. После 15 мин инкубации с гепарином (200 мкг/мл) суспензию разбавляют до концентрации 50 миллионов сперматозоидов в мл.

Оплодотворение in vitro и обеспечение ранних стадий развития эмбрионов. Оплодотворение яйцеклеток у млекопитающих осуществляется в яйцеводах. Это затрудняет доступ исследователя к изучению условий среды, в которой происходит процесс оплодотворения. Поэтому система оплодотворения in vitro была бы ценным аналитическим инструментом для изучения биохимических и физиологических факторов, включающихся в процесс успешного соединения гамет.

Применяют следующую схему оплодотворения in vitro и культивирования ранних эмбрионов крупного рогатого скота. Оплодотворение in vitro проводят в капле модифицированной среды Тироида. После созревания in vitro ооциты частично очищают от окружающих экспандированных кумулюсных клеток и переносят в микрокапле по пять ооцитов в каждой. Суспензия сперматозоидов объемом 2-5 мкл добавляется к среде с ооцитами, чтобы достичь концентрации сперматозоидов в каплях 1-1,5 млн/мл. Через 44-48 ч после осеменения определяют наличие дробления ооцитов. Затем эмбрионы помещают на монослой эпителиальных клеток для дальнейшего развития в течение 5 дней.

Еще несколько десятилетий назад диагноз «бесплодие» фактически означал приговор, и семьям, у которых не получалось зачать ребенка, оставалось надеяться только на чудо. Сегодня, благодаря развитию медицины, многие проблемы стали решаемыми, даже в том случае, если причина бесплодия не поддается медикаментозному или хирургическому лечению.

На помощь бесплодным парам пришло экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО) – наиболее эффективная на сегодняшний день репродуктивная технология.

Экстракорпоральное оплодотворение – это, если расшифровывать дословно, оплодотворение яйцеклетки, которое происходит вне («extra») тела («corpus). У этого распространенного термина есть синонимы – «искусственное оплодотворение» или «оплодотворение in vitro».

Можно считать, что история открытия экстракорпорального оплодотворения началась в середине XX века, когда ученые стали предпринимать попытки применять теоретические знания о возможном зачатии во внешней среде на практике. Так, в 1966 году английский исследователь Роберт Эдвардс описал механизм созревания яйцеклеток in vitro, за что 44 года спустя получил Нобелевскую премию. Однако первая успешная процедура ЭКО датируется лишь 1977 годом. Это произошло в Великобритании, а в 1978 году на свет появилась зачатая в пробирке девочка. В СССР первый ребенок из пробирки родился в Москве, в 1986 году.

Несмотря на то, что современные подходы к экстракорпоральным методам оплодотворения многократно доказали свою эффективность, по-прежнему существует немало мифов об этой процедуре. Самые распространенные среди них:

— ребенок будет отличаться от тех, что были зачаты естественным путем;

— ЭКО – это опасно для организма;

— дети из пробирки более слабые и болеют чаще;

— беременность ЭКО всегда многоплодная, причем количество близнецов – больше двух;

— искусственное оплодотворение требует долгого нахождения в стационаре;

— процедура очень дорогая.

Однако на практике оказывается, что все это – не более чем домыслы. Ребенок, рожденный в результате ЭКО, абсолютно ничем не отличается от других детей; беременность может быть многоплодной, но не всегда. При отсутствии осложнений (которые бывают редко) ЭКО делается амбулаторно. Ну а финансовые затраты на проведение процедуры и подготовку к ней сегодня взяло на себя государство: с 2015 года в России проводится .

Как происходит экстракорпоральное оплодотворение

Экстракорпоральное оплодотворение — самая современная вспомогательная репродуктивная технология, применяемая при различных формах бесплодия

Клиники, практикующие репродуктивные технологии, предлагают разные . Однако они отличаются, по большому счету, лишь набором предлагаемых услуг и дополнительных процедур, тогда как общая суть и последовательность действий остается неизменной. Оплодотворение in vitro проводится в несколько этапов.

1. Подготовка к ЭКО . На этом этапе с помощью лекарственных средств производится стимуляция овуляции, чтобы у репродуктологов была возможность получить зрелые яйцеклетки. Для этого пациентке делают инъекции гормональных препаратов – лютеинизирующего и фолликулостимулирующего гормонов, а также ХГЧ. Схема их введения называется протоколом; ее врач подбирает индивидуально.
2. Получение яйцеклеток и сперматозоидов . В первом случае делается пункция фолликулов под контролем УЗИ, во втором используется самостоятельная мастурбация. Если нет возможности получить яйцеклетку от пациентки, а сперму от ее партнера, используется донорский генетический материал. Подготовка к экстракорпоральному оплодотворению заканчивается специальной обработкой спермы и ооцитов.
3. Собственно зачатие in vitro . Оно проводится одним из двух методов экстракорпорального оплодотворения:

— добавление к яйцеклеткам, находящимся во внешней питательной среде, сперматозоидов (из расчета примерно 1:100 000);

— ручное введение сперматозоида в яйцеклетку (ИКСИ). Этот метод используется в том случае, если качество спермы плохое и необходимо предварительно выбрать подходящий сперматозоид, или если их подвижности критически снижена.

В специальной среде получившиеся эмбрионы развиваются под контролем репродуктологов 2-5 дней.

1. Перенос эмбриона с помощью тонкого катетера. Процедура занимает несколько минут и выполняется без анестезии. Сегодня переносится два эмбриона, что снижает риск многоплодной беременности.

Кроме основных этапов ЭКО, пациентам в рамках некоторых программ предлагаются дополнительные, направленные на повышение эффективности процедуры:

— хетчинг – рассечение эмбриональной оболочки, которое увеличивает вероятность имплантации;

— криоконсервация – замораживание выращенных, но не подсаженных эмбрионов на тот случай, если попытка оплодотворения окажется неудачной.

Отметим, что репродуктология продолжает двигаться вперед. Например, в Великобритании не так давно разрешили экстракорпоральное оплодотворение от трех родителей, которое снижает риск развития генетических заболеваний. Процедура предполагает, что здоровая ДНК пациентки пересаживается в яйцеклетку другой женщины, которая, в свою очередь, подсаживается первой.

Беременность после ЭКО

На 14 день после процедуры делается тест на ХГЧ для определения наступления беременности. По статистике, успешными являются около 30 % всех процедур ЭКО. Во всех остальных случаях пациенткам приходится предпринимать повторные попытки искусственного оплодотворения.

В первое время после процедуры назначается гормональная поддержка. Кроме того, рекомендуется щадящий режим:

— спокойствие;

— следует избегать поднятия тяжестей;

— лучше отказаться от значительных физических нагрузок;

— сбалансированное питание;

— половой покой;

— нужно избегать вирусных и бактериальных инфекций, стараться не допускать обострения хронических заболеваний.

В остальном беременность после искусственного оплодотворения ничем не отличается от той, что наступила естественным путем. На всем ее протяжении будут актуальны стандартные врачебные рекомендации.

ВИДЕО Методика экстракорпорального оплодотворения

Показания и противопоказания к экстракорпоральному оплодотворению

Далеко не в каждом случае невозможности зачатия показана процедура ЭКО. Перечислим основные среди , которые становятся показаниями к искусственному оплодотворению:

1. Женский фактор:

— трубные патологии (анатомические и функциональные изменения);

— невозможность выхода яйцеклетки;

— эндометриоз (при некоторых вариантах расположения очагов, когда они препятствуют попаданию яйцеклетки в трубу);

— отсутствие яичников;

— маточные патологии (отсутствие или нарушения строения матки);

— бесплодие неясного генеза.

Читайте также:

• 1. Мужской фактор:

— отсутствие спермы (азооспермия);

— критически слабая подвижность сперматозоидов;

— преобладание патологических сперматозоидов;

Нельзя не упомянуть и о противопоказаниях к экстракорпоральному оплодотворению:

— психические заболевания потенциальных рожениц;

— деформации матки, при которых невозможно вынашивание беременности;

— доброкачественные опухоли яичников и матки;

— любые воспалительные заболевания в остром периоде;

— злокачественные опухоли (а также в анамнезе).

Проблемы экстракорпорального оплодотворения

Гормональная гиперстимуляция из-за неправильно подобранной схемы введения препаратов — наиболее распространенное осложнение при подготовке к ЭКО

Как уже упоминалось, осложнения, связанные с собственно ЭКО, встречаются редко; самое распространенное среди них – гиперстимуляция, вызванная неправильным подбором гормональных препаратов. Невынашивание такой беременности возможно, но не чаще, чем прерывание беременности, наступившей естественным путем. Иными словами, выкидыш в обоих случаях может произойти по причине гормонального сбоя, инфекции, травмы – вне зависимости от того, каким образом наступила беременность.

Долгое время особенно актуальной была проблема многоплодной беременности после искусственного оплодотворения, поскольку в матку переносилось до пяти эмбрионов. Однако сегодня ее удалось решить: благодаря современным технологиям вероятность имплантации зародышей увеличилась, а потому для переноса используется два эмбриона.

Наконец, третья проблема – этического характера. Все мировые религии относятся к ЭКО неоднозначно. Например, в православии допускается искусственное оплодотворение в том случае, если использовался генетический материал мужа. Негативно православная церковь относится к донорству спермы и использованию суррогатных матерей.

Экстракорпоральное оплодотворение (от лат. extra — снаружи, вне и лат. corpus — тело, то есть оплодотворение вне тела, сокр. ЭКО) — медицинская технология, используемая для лечения бесплодия. Синонимы: «оплодотворение в пробирке», «оплодотворение in vitro», «искусственное оплодотворение».

Метод (ЭКО) был впервые применен в медицинской практике в 1978 г. Суть процедуры сводится к получению из яичников женщины созревших яйцеклеток, оплодотворению их сперматозоидами мужа (донора), выращиванию получившихся эмбрионов в специальной среде вне организма женщины (инкубаторе) и переносу эмбрионов в матку. Детей, родившихся благодаря применению этого метода, в обиходе часто называют «пробирочными» детьми, т.к. те этапы развития яйцеклетки и эмбриона, которые обычно проходят в трубе в первые 2-3 дня после оплодотворения, при ЭКО происходят в искусственных условиях — «в пробирке».

Метод ЭКО относится к методам вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), которые используются в случае, когда лечение бесплодия средствами «первой линии» (индукция овуляции, внутриматочная инсеминация, оперативное лечение) не приносит результатов.

Противопоказаниями для проведения ЭКО являются состояния женщины, при которых беременность и роды угрожают здоровью матери или ребенка, а именно:

• соматические и психические заболевания, являющиеся противопоказаниями для вынашивания беременности и родов;
• врожденные пороки развития или приобретенные деформации полости матки, при которых невозможна имплантация эмбрионов или вынашивание беременности;
• опухоли яичников;
• доброкачественные опухоли матки, требующие оперативного лечения;
• острые воспалительные заболевания любой локализации;
• злокачественные новообразования любой локализации, в том числе в анамнезе.

Противопоказания для проведения ЭКО со стороны мужчины отсутствуют.

Главными требованиями для проведения ЭКО в Сингапуре являются следующие:

• пара должна официально состоять в браке;
• возраст женщины не должне превышать 45 лет.

Этапы программы ЭКО

Технологию ЭКО осуществляют в специализированных медицинских учреждениях в условиях амбулаторного лечения. Для проведения процедуры экстракорпорального оплодотворения необходимо получить яйцеклетки, получить сперматозоиды, провести оплодотворение in vitro, вырастить эмбрион, ввести эмбрион в полость матки женщины.

Целью лечения методом ЭКО является получение большого числа яйцеклеток для экстракорпорального оплодотворения (оплодотворение вне организма женщины, в искусственных условиях) спермой мужа (или донора) и перенос полученных таким оразом эмбрионов в полость матки женщины. Лечебный цикл ЭКО длится 15-30 дней (в зависимости от вида протокола) и состоит из 4-х последовательных этапов:

Получение яйцеклеток

Как правило, для экстракорпорального оплодотворения стараются получить несколько яйцеклеток, так как это повышает эффективность лечения бесплодия этим методом. Поскольку в норме у женщины в течение одного менструального цикла созревает одна яйцеклетка, то для получения нескольких яйцеклеток проводят так называемую процедуру «стимуляции суперовуляции». Для этого пациентке назначают инъекции гормональных
препаратов. Для стимуляции используют инъекции препаратов фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), лютеинизирующего гормона (ЛГ), хорионического гонадотропина (ХГ), а также блокаторов гонадотропин-рилизинг гормона (ГнРГ). Сочетание видов и количества вводимых гормональных препаратов называют «схемой стимуляции». Существует несколько схем стимуляции суперовуляции, но окончательное количество, типы и длительность введения препаратов подбирают индивидуально для каждой женщины. В зависимости от схемы стимуляция суперовуляции занимает время от 7 до 50 дней и требует подкожного введения препаратов (ежедневные инъекции, либо введение подкожных капсул).

Созревание яйцеклеток непосредственно не может быть определено неинвазивными методами. Поэтому о созревании яйцеклеток судят косвенно по росту фолликулов яичника. Рост фолликулов наблюдают с помощью аппаратов ультразвукового исследования. При достижении доминантного фолликула определенного размера (16-20 мм) назначают процедуру извлечения яйцеклеток — пункцию фолликулов яичника. Пункцию фолликулов проводят под общей (чаще) или местной (реже) анестезией, иглу проводят трансвагинально, ход иглы контролируют аппаратом УЗИ. Целью пункции является аспирация (отсасывание) содержимого фолликула (фолликулярной жидкости). Полученную жидкость исследуют с помощью микроскопа для обнаружения яйцеклеток. Обнаруженные яйцеклетки отмывают от фолликулярной жидкости и переносят в лабораторную посуду с культуральной средой. Посуду с яйцеклетками помещают в инкубаторы, где они содержатся до оплодотворения.

Обычно использование гормональных препаратов и проведение пункции фолликулов не вызывает негативных реакций у пациентки, но иногда могут возникнуть осложнения. Осложнением стимуляции суперовуляции является синдром гиперстимуляции яичников (СГЯ), который может развиться спустя несколько дней после окончания стимуляции. СГЯ возникает при созревании большого количества фолликулов, которые, трансформируясь в желтые тела, секретируют большое количество эстрогенов. При тяжелом течении СГЯ может потребоваться госпитализация больной. Осложнением пункции фолликулов может явиться гематома яичника.

Получение спермы

Сперму пациент получает самостоятельно с помощью мастурбации. Возможно использование прерванного коитуса, либо медицинского презерватива без смазки. В случае невозможности получения спермы путем эякуляции, используют хирургические методы: аспирация содержимого эпидидимиса, биопсия яичка и пр. Сперму получают в день пункции фолликулов супруги. Если получение спермы в день пункции невозможно, то используют предварительное получение спермы с последующим замораживанием и хранением в жидком азоте (криоконсервация). Перед оплодотворением яйцеклетки сперматозоиды отделяют от семенной жидкости. Для этого проводят многократноецентрифугирование спермы в культуральной среде.

Оплодотворение in vitro

Непосредственно ЭКО проводится врачами-эмбриологами в условиях эмбриологической лаборатории. Собственно оплодотворение проводят одним из двух способов: 1) инсеминация in vitro; 2) интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ICSI, ИКСИ). При первом, более простом способе к яйцеклеткам, которые находятся в питательной среде, добавляют суспензию сперматозоидов. Сперматозоиды добавляют из расчета 100-200 тыс. на одну яйцеклетку. В течение 2-3 часов один из сперматозоидов проникает в яйцеклетку и тем самым оплодотворяет ее. При втором способе (ИКСИ) сперматозоид вводят в яйцеклетку «вручную» с помощью микрохирургических инструментов. ИКСИ используют при очень плохом качестве спермы, когда оплодотворение не может быть получено даже в чашке. После проникновения сперматозоида яйцеклетка считается эмбрионом. Вероятность успешного оплодотворения 60-70%. Эмбрионы содержат в искусственных условиях от 2 до 5 дней.

Перенос эмбриона в матку

Перенос эмбриона в матку осуществляют через 2-5 дней после оплодотворения яйцеклетки. Процедура не требует анестезии (обезболивания) и выполняется на гинекологическом кресле в течение нескольких минут. Эмбрион переносят в матку, проводя через шейку матки специальный эластичный катетер. Современная практика ЭКО такова, что обычно осуществляют перенос 2 эмбрионов.

Дополнительные мероприятия при культивировании эмбрионов

В течение культивирования эмбрионов возможно осуществление дополнительных лабораторных мероприятий. Криоконсервация эмбрионов — жизнеспособные эмбрионы замораживают и хранят при температуре жидкого азота. В дальнейшем эмбрионы могут быть разморожены и осуществлен повторный перенос в матку для достижения беременности. Преимплантационная генетическая диагностика (ПГД) — исследование наличия некоторых хромосомных или некоторых генетических патологий у эмбриона до имплантации. Также этим методом возможно определить пол эмбриона.

Беременность при ЭКО наступает в 30-40 % случаев. Поэтому сама процедура называется попыткой. Существуют некоторые факторы, приводящие к неудаче программы ЭКО:

• при стимуляции овуляции отсутствует рост яйцеклеток;
• преждевременная овуляция;
• невозможность получения яйцеклетки при пункции;
• плохое качество полученных яйцеклеток;
• отсутствие оплодотворения из-за патологии спермы и\или плохого качества яйцеклеток;
• возможнсть проникновения в яйцеклетку нескольких сперматозоидов;
• остутсвие процесса деления клеток эмбриона или образование эмбриов плохого качества;
• проблемы имплантации (прикрепления) эмбрионов в полости матки.

Из 20 наступивших беременностей родами заканчиваются в среднем 18. После введения эмбрионов один раз в 3 дня нужно контролировать уровень гормонов в крови. Через 12 дней выполняется тест на беременность. В случае многоплодной беременности по желанию женщины выполняют редукцию — удаление ненужных эмбрионов.

Роды при беременности после ЭКО ничем не отличаются от обычных. В тех случаях когда причина бесплодия — болезнь женщины, роды проводятся с учётом конкретной болезни и к способу оплодотворения это уже не имеет никакого отношения.

По мнению врачей, дети зачатые в пробирке ничем не отличаются от остальных. Тем не менее, есть мнение, что такие дети лучше учатся, но чаще болеют. Врачи считают, что это может быть связано с чрезмерной опекой желанного ребёнка.