Показания и методы анализа на токсоплазмоз. Анализ на токсоплазмоз: как сдавать, расшифровка результатов Расшифровка анализа крови на токсоплазмоз

28.06.2019

Обязательный к сдаче анализ на токсоплазмоз включен в комплекс анализов на так называемые TORCH-инфекции, рекомендуемый каждой беременной женщине. Вообще-то, токсоплазмоз у человека может протекать без проявления какой-либо симптоматики, так, что люди даже не подозревают о его наличии.

Зачем сдавать анализ

Развиваясь в организме беременной женщины, токсоплазма может приводить к тяжелым патологиям эмбриона.

Ооцисты попадают к промежуточным хозяевам в организм. Именно в их роли могут выступать человек, птицы, крупный и мелкий рогатый скот и животные из отряда грызунов. Внедряясь в мышцы и внутренние органы, ооцисты трансформируются в цисты и псевдоцисты. Такому заражению способствуют поедание недостаточно хорошо вымытых овощей и зелени и пренебрежение мытьем рук после контактирования с экскрементами инфицированных кошек (уборка у животного в лотке). При употреблении в пищу недостаточно прожаренных мясных блюд – в организм попадают вышеупомянутые формы микроорганизма.

Обратите внимание! Хотя степень вероятности инфицирования плода у человека не превышает 15% в течение начального триместра беременности, для беременных женщин будет крайне важно своевременно сдать в лаборатории анализ крови на токсоплазмоз.

Если в доме живет кошка, то очень желательно сдать анализ на токсоплазмоз и вашему питомцу. В случае выявления возбудителя рекомендуется временно передать кошку на содержание к родственникам или знакомым до излечения пушистого пациента и/или до наступления родов у его хозяйки.

Диагностика

Диагностика токсоплазмоза проводится в лаборатории при помощи исследования крови.
Кровь на токсоплазмоз рекомендуется сдавать, если:

у пациентки планируется беременность или она уже наступила;
у беременной выявили лимфоаденопатию неясного генеза, при этом ранее анализ крови на токсоплазмоз она не сдавала;
пациент является ВИЧ-инфицированным;
при обследовании у пациента выявлены увеличение печени и/или селезенки неясного генеза;
имеет место недиагностированное лихорадочное состояние;
при обследовании беременной пациентки в анализе были получены результаты сомнительного характера по поводу наличия антител к токсоплазме.

Главными методами диагностирования токсоплазмоза считаются:

исследование крови при помощи проведения ИФА (иммуноферментного анализа);
иммунохемилюминесцентный анализ (ИХЛА);
ПЦР-диагностирование (полимеразная цепная реакция).

Первый и второй методы позволяют выявить в крови иммуноглобулины - антитела к токсоплазмозу IgG и IgM.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) определяет наличие в исследуемом материале непосредственно белков возбудителя, вызывающего токсоплазмоз.

Токсоплазмы не отличаются от других микроорганизмов в том, что состоят из антигенов, являющихся сложными органическими веществами. При проникновении антигена в кровь иммунитет человека реагирует выработкой антител-иммуноглобулинов, накапливающихся в определенных количествах, называемых титрами.

Выработка IgM начинается с первых дней инфицирования, а максимальные их титры наблюдаются на второй-третьей неделе заболевания. Таким образом, при обнаружении в крови IgM мы говорим об остром процессе.
В течение трех, а иногда и менее месяцев – антитела данного класса исчезают, полностью уступая место иммуноглобулинам IgG, начало выработки которых приходится на вторые-третьи сутки после «запуска» выработки IgM. Максимальной концентрации они достигают к концу первого месяца после начала заболевания.

Иммуноглобулины G не пропадают, они остаются в крови на долгое время, нередко, что и пожизненно. По этой причине у переболевшего пациента имеет место специфический тип иммунной реакции, работающий против токсоплазменных клеток так, что при реинфицировании болезнь более не развивается.

Когда у беременных пациенток сданный анализ на антитела к токсоплазмозу показывает наличие в крови только антител IgG, не нужно беспокоиться за здоровье будущего ребенка.

В различных лабораториях методики проведения анализов разнятся, по сему и значения результатов «норма/повышение титра» будут отличаться друг от друга в разных учреждениях. Как правило, в бланках указывается как сам результат, так и нормальная величина.

Когда результат оказывается больше нормальной величины, речь идет о положительном результате проведенного анализа.
Когда антитела искомого типа при анализе не обнаруживаются, или же их титр находится в пределах нормы/ниже, это говорит об отрицательном его результате.

Повышенный титр обнаруженных при анализе IgM говорит о том, что заражение произошло не более нескольких мес. тому назад. В том случае, когда при этом IgG не обнаружены, то можно наверняка говорить об активном остром процессе.
ПЦР-диагностика характеризуется как наиболее чувствительный метод обнаружения возбудителя инфекции. При проведении данного метода ДНК токсоплазмы обнаруживают в образце крови, реже на исследование берут мочу.

Поскольку ПЦР, несомненно, является дорогостоящим методом, он используется, как правило, для подтверждения либо опровержения того результата, который уже был получен при проведении ИФА. Положительный результат ПЦР говорит о том, что возбудитель в организме все-таки действительно присутствует, и имеет место острый инфекционный процесс; отрицательный – о том, что его уже нет.

Обратите внимание! Грамотную расшифровку результатов исследований на токсоплазмоз может сделать только врач, с учетом не одних лишь показателей анализа, но и данных дополнительных диагностических исследований.

Часто пациенты интересуются, как сдавать анализ на токсоплазмоз правильно, нужно ли соблюдать какие-то ограничения перед сдачей крови? На самом деле, никакой подготовки к сдаче анализа крови на токсоплазмоз не требуется. Рекомендуется лишь накануне сдачи ограничить прием жирной пищи и на следующий день сдать анализы натощак.

Дополнительные диагностические методики

Дополнительную информацию об антителах IgG к токсоплазмозу, которая будет полезна лечащему врачу как в диагностическом, так и в плане дачи прогноза при подозрении на наличие у пациента токсоплазменной инфекции, можно получить, определив у пациента авидность антител. Особенно такие исследования будут актуальны при беременности либо ее планировании пациенткой.

В лабораторных условиях определение авидности IgG играет роль дополнительно подтверждающих диагноз тестовых исследований. Их следует назначить при выявлении у пациента таких результатов:
IgG с превышением пограничного значения, IgM – либо положительный, либо сомнительный;

При формировании у пациента реакции иммунитета в связи с внедрением возбудителя, простимулированный лимфоцитарный клон формирует поначалу специфические белки IgM, а затем - специфические IgG. По характеристике начальные IgG имеют свойства низкой авидности, они слабо могут связывать антиген. По ходу развития иммунной реакции постепенно в организме (за недели и месяцы) наблюдается нарастание синтеза лимфоцитарными клетками IgG, обладающих высокой авидностью, которые связаны с комплементарными им антигенами уже куда более крепко. Для специфических белков IgG высокая их степень авидности говорит о том, что недавнее первоначальное инфицирование исключено в данном случае. Этот факт имеет большое прогностическое значение у беременных пациенток.
Давайте разберемся, почему мы делаем такой вывод.

В ряде случаев следовые количества белков IgM к токсоплазме могут выявляться в течение одного, двух и даже более лет. То есть, можно говорить о том, что если они и были обнаружены в крови, взятой у беременной женщины, то все равно нельзя однозначно быть уверенными в том, что имеет место первичное инфицирование в период протекающей беременности. Возможны также и ложноположительные результаты при очень высокочувствительных системах. И в этих случаях определения в крови белков IgG с высокой авидностью говорит о том, что недавнее первоначальное инфицирование исключено.

IgG низкой авидности, в среднем, обнаруживаются в течение трех-пяти мес. от начала развития инфекции. Иногда они могут вырабатываться и дольше. Обнаружение IgG низкой авидности само по себе не может давать повод безоговорочно утверждать то, что мы имеем дело со свежей инфекцией. Однако, в качестве дополнительного ее подтверждения – вполне подходит. Когда мы наблюдаем реактивацию инфекционного процесса, в крови определяются специфические высокоавидные IgG.

индекс авидности IgG к токсоплазме < 0,3 = присутствие IgG низкой авидности, то есть здесь мы не можем исключить первичное инфицирование в течение последних 4 мес.;
индекс авидности IgG к токсоплазме ≥0,35 = присутствие IgG высокой авидности, то есть здесь мы можем исключить первичное токсоплазменное инфицирование в течение последних 4 мес.;
индекса авидности IgG к токсоплазме равен 0,3-0,35 = это пограничный уровень авидности для IgG в исследуемом материале.

Итоги

Своевременная постановка диагноза и комплекс лечебно-профилактических мероприятий позволяют избежать серьезных осложнений при заболевании токсоплазмозом среди потенциальных групп риска.

После проникновения в тело человека токсоплазмы заселяют его кишечник. С током крови и лимфы они распространяются по организму. Токсоплазмы поражают селезенку, печень, органы зрения, нервную, лимфатическую и сердечно-сосудистую системы. Заболевание опасно для людей с ослабленным иммунитетом. Показания к проведению исследования:

увеличение печени и селезенки по неясной причине;
планирование беременности и период вынашивания ребенка;
озноб и жар неизвестного происхождения;
увеличенные лимфатические узлы (без выявленной причины);
сомнения после предыдущего анализа на эту инфекцию;
состояния иммунодефицита.

Виды анализов на токсоплазмоз

Цель анализа – выявить присутствие в организме токсоплазм. Исследование проводят несколькими методами. Они имеют разную чувствительность, дают качественные или количественные результаты. Виды исследований на токсоплазмоз:

Название	Краткая характеристика	Стоимость, рублей
Распространенные виды исследований
Иммуноферментный анализ крови на токсоплазмоз (ИФА)	Чувствительность ИФА достигает 90%. Исследование помогает отслеживать динамику развития заболевания. Суть анализа – выявление иммунного ответа организма, а не самого возбудителя. В крови человека определяют уровень специфических антител: Иммуноглобулинов M (IgM). Вырабатываются иммунной системой в начале заболевания. Концентрация достигает максимума через 2-3 недели. Затем количество уменьшается и вскоре антитела исчезают. Иммуноглобулинов G (IgG). Появляются спустя 3 дня как вторичный ответ на инфекцию. Остаются в крови надолго, у части пациентов – на всю жизнь. За счет антител человек остается защищенным от токсоплазмоза, которым он переболел. Антитела – это специфические белки. Их вырабатывают иммунные клетки лимфоциты в ответ на проникновение в организм возбудителей. ИФА позволяет сравнивать количество антител в разные временные промежутки. Также исследование определяет показатель авидности (прочность связи антител с белками возбудителя).
Полимеразная цепная реакция (ПЦР)	Проводится, если ИФА дал сомнительные результаты. Дает более точные результаты. Суть анализа – обнаружение ДНК и РНК токсоплазм в биологическом материале: крови, моче, слюне. ПЦР не выявляет количество возбудителей, а только определяет их присутствие. Чувствительность исследования – 10-1000 клеток во взятом образце. Для микроскопических и иммунологических методов этот показатель составляет 103-105. Из одной биологической пробы можно обнаружить сразу несколько возбудителей.
Менее популярные исследования
Мазок с миндалин	Выявляет наличие, вид и количество возбудителей, которые вызывают инфекцию.
Мазок из осадка спинномозговой жидкости	Исследование помогает выявить поражения центральной нервной системы. При исследовании изучают цвет ликвора и наличие в нем форменных элементов крови.
Внутрикожная проба с токсоплазмином	Человеку делают инъекцию, после чего отслеживают реакцию организма. Ее изучают через 24-48 ч. Положительный результат – это покраснение и отечность в месте пробы.

Подготовка

К анализу методом ПЦР не требуется особой подготовки. Пациенту не следует накануне употреблять жареную пищу. С утра перед анализом нельзя есть и пить. Для сдачи мочи в чистый стерильный контейнер собирают ее утреннюю первую порцию. Особенности подготовки к ИФА:

Как сдавать анализ

Для ПЦР-исследования используются биологические жидкости и среды человека. При подозрении на токсоплазмоз могут брать мочу или кровь из вены.

Последнюю сдают натощак, как и при иммуноферментном анализе. Кровь забирают из вены следующим образом:

На область выше сгиба локтя накладывают жгут. В течение пары секунд вена наполняется кровью.
Тонкой иглой делают прокол вены и набирают кровь.
Жгут снимают, а к месту прокола прикладывают стерильную салфетку.

Расшифровка иммуноферментного анализа

После проведения исследования пациенту выдают бланк, где указывается расшифровка анализа на токсоплазмоз. Иногда в нем описывают нормы и отклонения от нее. При проведении ИФА возможно 4 варианта результатов:

Результат	Что означает
IgM и IgG отрицательно	Организм не имеет естественного иммунитета к инфекции, человек ей не болел. Беременные женщины попадают в группу риска. Они сдают анализы на токсоплазмоз при беременности в каждом триместре.
IgM положительно, IgG отрицательно	У пациента острый токсоплазмоз. Во время беременности высок риск внутриутробного инфицирования плода, возникновения врожденного токсоплазмоза или пороков развития. Беременной назначают ПЦР мочи и крови. Через 2-3 недели уровень IgG и IgM проверяют еще раз.
IgM отрицательно, IgG положительно	Встречается у 65% населения. Он указывает на хронический токсоплазмоз или на стойкий иммунитет к заболеванию. Учитывают показатель авидности. При высоких значениях риск заражения инфекции минимальный. Во время беременности назначают ПЦР-исследование и определение авидности. Женщина сдает кровь или мочу.
IgM и IgG положительно	Это показатель недавно перенесенного или острого токсоплазмоза. Антитела IgM присутствуют в крови еще 3-4 месяца после выздоровления. Чтобы уточнить результаты, врач назначает ПЦР на токсоплазмоз. Повторно определяют показатель авидности.

Пройти диагностику необходимо при наличии следующих симптомов:

повышенной температуры тела без видимых причин;
болей в мышечных тканях;
мигрени;
повышенной слабости и утомляемости;
анемии;
увеличения лимфоузлов.

Анализ на токсоплазмоз назначается при анемии

Эти симптомы считаются ранними и при своевременном обращении к специалисту и лечении патологии можно легко от них избавиться. При дальнейших поражениях симптомы глистной инвазии усугубляются, и может появиться:

язва;
снижение остроты зрения;
ухудшение памяти и нарушение речи;
снижение аппетита и резкая потеря веса;
бессонница;
появление аллергии и сыпи на коже.

Специфика анализа на лямблии

Основные методы диагностики токсоплазмоза

В отличие от кишечных инвазий, токсоплазмы обитают преимущественно в лимфатических сосудах, поэтому выявить их в кале невозможно. Самыми достоверными методами диагностики являются исследования крови. Эти методы основаны на появлении антител крови к антигенам токсоплазм по прошествии определенного периода времени. Антитела к антигенам токсоплазм выделяются через 2-3 недели, поэтому перед беременностью необходимо проходить обследование заранее, так как на момент диагностики антитела могли еще не появиться. Наиболее информативными методами диагностики считаются:

ИФА – иммуноферментный анализ крови;
ПЦР – полимезарная цепная реакция.

Понятие иммуноферментного анализа крови

Иммуноферментный анализ крови на токсоплазмоз

Иммуноглобулины IgG появляются в течение месяца. Они появляются тогда, когда IgM уже исчезли. Антитела IgG – это иммунитет, который остается в организме на всю жизнь. Иммунитет IgG обеспечивает защиту от токсоплазм, поэтому, как правило, человек болел токсоплазмозом 1 раз в жизни, а затем организм вырабатывает иммунитет и может противостоять вторичному заражению.

Результаты ИФА с использованием антигенных белков

Расшифровка результатов зависит от стадии течение заражения, поэтому рекомендуется пройти обследование повторно через 3-4 недели.

Показатели авидности

Результаты анализа на токсоплазмоз при отрицательном IgM и положительном IgG учитывают показатели авидности. Авидность – это способность антител противостоять чужеродным микроорганизмам.

Пути заражения токсоплазмозом при беременности

Планируя беременность, необходимо обязательно сдать анализы на глистов. Их своевременное выявление и лечение может спасти вашему малышу жизнь.

ПЦР анализ на токсоплазмоз

Полимезарная цепная реакция (ПЦР) считает одним из наиболее информативных методов диагностики. Он проводиться для выявления ДНК и РНК токсоплазм в организме человека. Для анализов необходим любой образец человеческого ДНК, не обязательно кровь. ПЦР дает максимально точные результаты. Для первоначального исследования патологии применяется ИФА, а ПЦР применяется для подтверждения или опровержения диагноза.

Разберём широко применяемые анализы на токсоплазмоз, когда пациент просто сдал кровь в лаборатории. И первый из них – это ПЦР.

ПЦР

Если в крови у беременной обнаружены антитела класса M и постепенно нарастают антитела класса G, о которых будет сказано ниже, то это свидетельствует о первичном заражении, о свежем процессе. Именно в этом случае, даже если женщина чувствует себя нормально, ее нужно срочно лечить, чтобы предотвратить заражение плода и появления врожденных уродств.

Также обнаружение этих иммуноглобулинов позволяют поставить диагноз острого токсоплазмоза у новорождённых малышей. Дело в том, что иммуноглобулины класса G являются общими, и у матери и у малыша.

Поэтому при их обнаружении у ребенка он сам может быть здоровым, но антитела попали к нему от переболевшей, и даже выздоровевшей матери. А вот иммуноглобулины класса М никак не могут пройти через плаценту, и поэтому, если их обнаружили в крови у ребенка, то расшифровка анализа говорит о том, что он болен токсоплазмозом и получил его внутриутробно. Выявление иммуноглобулинов класса М у малыша позволяет не только поставить ранний диагноз, но и начать срочное лечение, даже в случае низкого титра антител.

Антитела класса G к токсоплазме

О беременных мы уже сказали достаточно, анализ крови на токсоплазмоз у них является обязательным, причем неоднократно. Но в каких случаях анализ на токсоплазмоз должен назначаться другим категориям населения? Каковы показания к назначению ПЦР и исследованию иммуноглобулинов на токсоплазмоз?

Показания к исследованию крови

Кроме исследования беременных, а также женщин, желающих забеременеть, обследование на токсоплазмоз требуется следующим категориям населения:

увеличение печени и селезенки неясной природы, или синдром гепатоспленомегалии;
длительная и неясная лихорадка;
приобретенный иммунодефицит, а также ВИЧ-инфекция;
хроническое поражение мышечной ткани, или миозиты, (ведь токсоплазмоз способен поражать мышцы);
Лимфаденопатия (увеличение лимфоузлов), в том числе генерализованная, при отсутствии других причин;
привычное невынашивание беременности (это отдельный случай);
тяжелые неврологические заболевания, такие как энцефалиты, при отсутствии других причин.

Наконец, анализ крови на токсоплазмоз необходимо брать у тех членов семьи, у которых встречаются все вышеописанные состояния, или просто хронические инфекции, лихорадка и недомогание при наличии в доме кошек.

Как сдавать кровь на токсоплазмоз?

Для того чтобы сдать кровь на токсоплазмоз, не нужно никаких особенных приготовлений. Сдаётся обычная венозная кровь, которая берется из локтевой вены. Анализ необходимо проводить с утра натощак, и накануне анализа желательно ограничить физические нагрузки, не употреблять алкогольные напитки, а как минимум за час до забора крови желательно не курить. Никаких других особых приготовлений не требуется.

Результаты анализов

Как же можно интерпретировать результаты всех анализов, о которых было сказано выше?

ПЦР

В том случае, если речь идёт об антителах, или иммуноглобулинах, то у них существует своя норма в крови, или титр. Если у пациента речь идет об иммуноглобулинах класса М, то пороговым значением считается 1,1 у.е. (условная единица). Сверх этого значения и включительно считается, что выявлены специфические антитела.

Если у пациента титр антител меньше, чем 0,9 условных единиц, то антител нет. Конечно, этот диапазон является слишком узким. Но здесь приходится ориентироваться на дополнительные сведения из анамнеза. В случае положительных значений речь может идти как об острой инфекции, так и о неопределенном ее сроке (до года), а также о врожденном токсоплазмозе, но только в том случае, если исследование сделано в первые недели жизни малыша. Если иммуноглобулины класса М к токсоплазме не выявлены, то это может говорить не только о том, что человек здоров, но и том, что он болен, только срок заболевания незначительный, например, менее 3 недель, и антитела этого класса просто не успели наработаться.

У иммуноглобулинов класса G несколько другие референсные значения. Если в плазме 1,6 у.е и меньше – то ставится заключение – «отрицательно». Более 3 у. е — «положительно».

Если у пациента в сыворотке крови обнаружено больше 3 у. е, и в том числе при повторных исследованиях, то это говорит об активации инфекции, и ее распространении в организме, а снижение титра антител говорит, например, об успешном лечении.

О чём может сделать вывод врач в случае отрицательных значений? Во-первых, о том, что человек здоров, если при этом у него отрицательно ПЦР, и иммуноглобулины М. Во-вторых, у пациента на фоне токсоплазмозной инфекции может быть просто очень слабый иммунитет, что препятствует наработке нормальных антител. И, как и в прошлом случае, речь может идти об острой инфекции — до двух недель после заражения.

Токсоплазмоз – это серьезная инфекция. Следует помнить, что, наряду с , цитомегаловирусом и краснухой он входит в группу так называемых , который особенно опасно для беременных и для развития ребенка. А это значит, что консультация и лабораторное обследование на эту группу инфекций необходимо сделать еще за 3 месяца до планируемой беременности, поскольку, если что-либо выявится, то можно будет принять меры к диагностике и лечению, не допустить заражения будущего малыша.

Токсоплазмоз – протозойная инвазия, характеризующаяся большим разнообразием вариантов течения и полиморфизмом клинических проявлений. В 1972 г. эксперты ВОЗ включили токсоплазмоз в число зоонозов, наиболее опасных для здоровья человека, а позднее в связи с распространением ВИЧ-инфекции он был признан одной из немногих оппортунистических инфекций протозойной этиологии.

Токсоплазмозная инвазия имеет широкое, практически повсеместное распространение: на земном шаре от 500 млн до 1,5 млрд человек инфицировано токсоплазмами. Пораженность населения в разных странах зависит от санитарно-гигиенических условий, особенностей питания, влияния экологических факторов, частоты иммунодефицитных состояний и др. Показатели инфицированности населения в различных регионах России колеблются от 15 до 50%, а частота врождённого токсоплазмоза среди новорожденных составляет в среднем 3-8 детей на 1000 рождений.

Источником возбудителя инвазии являются домашняя кошка и многие виды диких и домашних животных. Однако кошки выделяют ооцисты с фекалиями в течение короткого периода (1-2 недели) и только в возрасте 4-5 месяцев, поэтому заражение непосредственно от кошки – окончательного хозяина возбудителя – происходит редко (например, заражение ребенка при контакте с фека лиями кошки в песочнице и несоблюдении правил гиги ены). Заражение людей происходит различными путями: алиментарным, контактным, конгенитальным (трансплацентарным), парентеральным, возможно заражение медицинского персонала, контактирующего с кровью. Часто люди заражаются при употреблении в пищу продуктов из непрошедшего достаточной термической обработки мяса промежуточных хозяев (куры гриль, шаурма, шашлык, сырой мясной фарш), плохо вымытых овощей и т.д. В зависимости от механизма инфицирования различают приобретенный и врожденный токсоплазмоз.

Приобретенный токсоплазмоз у взрослых чаще протекает бессимптомно – у 9095 % инвазированных лиц не наблюдается каких-либо значимых проявлений. Примерно 5–7% женщин впервые инфицируются в период беременности, в этих случаях токсоплазмоз особенно опасен: он вызывает прерывание беременности в ранние сроки, мертворождение, рождение детей с аномалиями развития, поражением ЦНС и др. При инфицировании женщин в течение всего периода беременности в среднем рождается 61% здоровых детей и 39% детей с врожденным токсоплазмозом. При первичной инфекции в период беременности передача возбудителя плоду при остром токсоплазмозе осуществляется в 40–50% случаев, при заражении плода в первом триместре тяжелая форма встречается в 40%, при заражении во втором или третьем триместре – в 17,7% и 2,7% случаев соответственно. Высокую патогенетическую значимость токсоплазмоз имеет для ВИЧ-инфицированных лиц, когда клинические формы заболевания развиваются в результате реактивации латентной инфекции. В России в настоящее время токсоплазмозный энцефалит является главной причиной поражения ЦНС у больных СПИДом (обычно при количестве CD4 лимфоцитов менее 0,1 х 10 9 /мкл).

Врожденный токсоплазмоз – острое или хроническое заболевание новорожденных, возникающее при инфицировании плода токсоплазмами во время внутриутробного развития. Он требует к себе особого внимания в связи с трудностью диагностики и возможностью тяжелых последствий заболевания. Единственным методом профилактики врожденного токсоплазмоза считается обследование беременных для выявления специфических АТ.

Клинические проявления инфекции у плода определяются преимущественно сроком беременности, в который произошло инфицирование и путем проникновения возбудителя (неблагоприятный исход преимущественно связан с гематогенным путем передачи инфекции). Выделяют три клинические формы врожденного токсоплазмоза, которые являются последовательными стадиями развития инфекционного процесса: острая генерализованная форма (с гепатоспленомегалией и желтухой), подострая (с явлениями энцефалита) и хроническая (с явлениями постэнцефалического дефекта).

При инфицировании в I и II триместрах беременности, когда стадия генерализации процесса заканчивается внутриутробно, чаще возникают самопроизвольные выкидыши, тяжелые аномалии развития, несовместимые с жизнью плода и ребенка, а также наиболее тяжелое поражение ЦНС и глаз. В подострой стадии заболевания ребенок рождается с выраженными симптомами поражения ЦНС – явлениями менингита или менингоэнцефалита, с клинической картиной очагового или диффузного поражения мозговых оболочек. В случаях, когда острая и подострая стадии прошли внутриутробно, ребенок рождается с хронической формой токсоплазмоза при наличии грубых повреждений ЦНС (картина постэнцефалитического состояния) и глаз (от хориоретинита до микрофтальмии).

При заражении в III триместре у новорожденных чаще преобладают асимптомные формы. Однако если инфицирование произошло незадолго до рождения ребенка, то внутриутробно начавшаяся стадия генерализации продолжается и после рождения и проявляется разнообразными клиническими симптомами.

Острая форма врожденного токсоплазмоза выявляется чаще всего у недоношенных детей, протекает очень тяжело по типу сепсиса. Летальность зараженных новорожденных колеблется от 1 до 6%. Выжившие дети страдают задержкой умственного развития или другими проявлениями нарушений ЦНС.

Показания к обследованию

Планирование беременности;
беременные женщины, в т. ч. при наличии отягощенного акушерского анамнеза или патологии при текущей беременности;
новорожденные при подозрении на внутриутробную инфекцию (врожденный токсоплазмоз);
наличие инфекционного синдрома (длительный субфебрилитет; лимфадениты, особенно шейный и затылочный; гепатоспленомегалия; гепатит и миокардит неясного генеза; подострый или хронический энцефалит; хориоретинит, увеит, прогрессирующая близорукость; острое лихорадочное заболевание с сыпью неясного генеза);
вторичные иммунодефициты;
больные на поздних стадиях ВИЧ-инфекции с признаками поражения ЦНС, сетчатки, легких, септического состояния.

Дифференциальная диагностика

При патологии беременности, гибели плода, мертворождении – с герпесвирусными инфекциями, парвовирусной инфекцией В19, краснухой;
у новорожденных и детей первого года жизни – с герпевирусными инфекциями;
при наличии инфекционного синдрома (лихорадки, лимфаденопатии, гепато- и(или) спленомегалии), гепатита неясной этиологии, хориоретинита, заднего увеита, поражения мозга (энцефалит) – с герпесвирусными инфекциями, ВИЧинфекцией с другими вторичными поражениями (ЦМВИ, грибковые поражения, прогрессирующая лейкоэнцефалопатия, опухоли ЦНС и пр.).

Материал для исследования

Венозная и пуповинная кровь, СМЖ, БАЛ, амниотическая, плевральная, субретинальная жидкость, стекловидное тело, пунктаты лимфатических узлов и костного мозга, ворсинки хориона, плацента, биоптаты, – визуальное выявление возбудителя с использованием микроскопии, выделение возбудителей в культуре клеток, биопроба на лабораторных животных, выявление ДНК токсоплазмы;
венозная и пуповинная кровь, СМЖ, БАЛ, амниотическая, плевральная, жидкость, пунктаты лимфатических узлов, стекловидного тела, костного мозга – выявление АГ токсоплазмы;
венозная и пуповинная кровь – выявление АТ к АГ токсоплазмы.

Этиологическая лабораторная диагностика включает визуальное выявление возбудителя с использованием микроскопии, выделение возбудителя в культуре клеток, обнаружение АГ или ДНК возбудителя, определение специфических АТ к АГ токсоплазмы.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Микроскопия мазков, мазков–отпечатков, гистологических срезов, биопроба на лабораторных животных, выделение возбудителя в культуре клеток позволяют провести идентификацию токсоплазм в тканях или биологических жидкостях пациента. Иногда при тяжелом течении токсоплазмоза у больных СПИДом (септическое состояние) возможно увидеть возбудитель при прямой микроскопии в мазке крови. Названные методы выявления T.gondii для рутинной диагностики токсоплазмоза применяются редко ввиду трудоемкости и длительности исполнения.

Для обнаружения АГ токсоплазм в исследуемом материале используют РИФ. Присутствие АГ, характерное для острой фазы токсоплазмоза, устанавливают по наличию специфического свечения, выявляемого с помощью люминесцентного микроскопа, исследование особо полезно для ранней диагностики.

Высокое диагностическое значение, преимущественно при остром и врожденном токсоплазмозе, имеет обнаружение ДНК токсоплазм в крови, СМЖ или биоптатах методом ПЦР, обладающим наиболее высокой чувствительностью и специфичностью. Диагностическая ценность определения ДНК патогена повышается при сочетании с определением специфических АТ.

АТ-токсо IgМ к АГ T.gondii относятся к биомаркерам острой фазы заболевания, они появляются первыми в ответ на внедрение возбудителя (в первые две недели после заражения), количество их достигает максимума через 4–8 недель. В течение нескольких месяцев эти АТ исчезают, но в отдельных случаях могут сохраняться до 18 месяцев с момента инфицирования. Через плаценту не передаются.

АТ-токсо IgA появляются через 2–3 недели после заражения, достигают максимальной концентрации через месяц, в 90% случаев исчезают через 6 месяцев, но иногда могут выявляться до года. При реактивации их концентрация увеличивается, что позволяет рассматривать IgA в качестве критерия активности инфекционного процесса. Через плаценту не передаются (являются собственными АТ новорожденного).

АТ-токсо IgG появляются с 6–8 недели инфицирования, достигают максимума через 1–2 мес и сохраняются (у отдельных лиц на высоком уровне) в течение нескольких лет, обеспечивая длительный иммунитет. Передаются через плаценту, обеспечивают «материнский» иммунитет.

Выявление АТ-токсо методом ИФА широко используется для эпидемиологических исследований и при перинатальном скрининге. Исследование имеет высокую чувствительность и специфичность, позволяет выявлять АТ-токсо разных классов. Стандартный подход направлен на выявление в сыворотке/плазме крови АТ-токсо IgМ и IgG. Обнаружение АТ IgМ позволяет дифференцировать активную инфекцию от латентно протекающей. Широкое используемое в рутинных исследованиях однократное выявление IgG имеет низкое диагностическое значение для определения формы инфекции. Определение авидности АТ IgG проводят для уточнения срока заражения, дифференциации острого и хронического токсоплазмоза. АТ IgG с низкой авидностью обнаруживаются в ранней стадии инфекции, АТ с высокой авидностью характерны для предшествующей инфекции. При наличии клинических показаний для обследования или для подтверждения/исключения врожденного токсоплазмоза целесообразно в лабораторный алгоритм включать выявление АТ IgА к T. gondii . Наличие АТ-токсо IgА свидетельствует в пользу активного процесса, позволяет установить подострое течение и рецидив заболевания. Тест может эффективно использоваться для ранней диагностики как врожденного, так и приобретенного токсоплазмоза.

Наличие высокого индекса авидности не исключает реактивацию токсоплазмоза (особенно на фоне иммунодефицита), поскольку установлена возможность персистенции T. gondii . В этом случае целесообразно определение специфических IgА. Использование комбинированных исследований – определение авидности АТ IgG и выявление АТ Ig А – позволяет при обнаружении АТ-токсо IgG в кратчайшее время (в течение 2–3 дней) завершить обследование и подтвердить (исключить) первичную инфекцию, подострое течение или обострение хронической инфекции.

Параллельное определение АТ-токсо в крови и СМЖ дает дополнительную информацию о специфическом прогрессирующем поражении мозга (в т. ч. и при врожденной патологии). Наличие АТ в СМЖ предполагает специфическое прогрессирующее поражение мозга. При поражении ЦНС, особенно при менингоэнцефалите и энцефалите, у новорожденных при подозрении на врожденный токсоплазмоз, тест имеет важное диагностическое и прогностическое значение. У больных с иммунодефицитом повышение уровня АТ IgG в СМЖ и выявление специфических IgМ наблюдается редко.

Показания к применению различных лабораторных исследований и особенности интерпретации результатов у разных категорий обследуемых

Скрининг при планировании беременности и у беременных женщин направлен на выявление АТ-токсо IgМ, IgА, IgG. Диагноз недавнего заражения токсоплазмозом, как правило, ставится при появлении специфических АТ у пациента с ранее отрицательными результатами таких исследований (сероконверсия). Отрицательные результаты исследования позволяют исключить токсоплазмоз.

Выявление АТ-токсо IgМ указывает на первичное инфицирование токсоплазмами, однако у беременных женщин и у лиц с аутоиммунной патологией (наличие ревматоидного фактора) возможен ложноположительный результат исследования.

При выявлении АТ-токсо IgМ для подтверждения диагноза и определения фазы инфекционного процесса целесообразны дополнительные исследования а) выявление ДНК токсоплазм в плазме крови; б) определение АТ-токсо IgА, наличие которых указывает на текущую инфекцию; в) обследование пациента в динамике (появление АТ IgG подтверждает диагноз острого токсоплазмоза); г) определение индекса авидности АТ IgG; наличие низкоавидных АТ свидетельствует в пользу заражения в течение последних 3–6 месяцев.

Выявление АТ-токсо IgА свидетельствует о первичном инфицировании токсоплазмами или реактивации инфекции. Появление отрицательного результата наличия АТ IgА при исследовании в динамике указывает на завершение активного процесса и эффективную терапию. Возможно длительное выявление АТ IgА у лиц с выраженным иммунодефицитом, как правило, при микст-инфекции (активно протекающей ЦМВИ).

Положительный результат однократного определения АТ IgG свидетельствует об инфицировании токсоплазмами, но не позволяет определить фазу инфекционного процесса. Рекомендуется повторно обследовать пациента в динамике через 3–4 недели: при активно протекающей инфекции наблюдается нарастание титра АТ. При таком подходе затягивается срок установления диагноза. Более целесообразно провести исследование авидности АТ IgG и/или определение АТ-токсо IgА.

Низкоавидные АТ IgG к антигенам T.gondii могут выявляться до 3–6 месяцев. Их наличие свидетельствует об острой инфекции, высокоавидных – о хронической инфекции (более 6 мес).

Диагностическое обследование беременной женщины включает определение АТ-токсо IgМ, IgА, IgG и при возможности – ДНК токсоплазм. Обследование проводят при наличии инфекционного синдрома (лимфаденопатия, длительный субфебрилитет неясного генеза, гепато- и спленомегалия) или выявлении признаков внутриутробной инфекции при УЗИ.

Наличие ДНК токсоплазмы и/или АТ-токсо IgМ и/или IgА свидетельствует о текущей инфекции, для оценки стадии инфекции необходимо определение авидности АТ IgG.

Для установления причины перинатальных потерь на разных сроках гестации с учетом влияния микст-инфекции на исход беременности, целесообразно параллельное исследование ткани погибших плодов и плаценты для выявления НК группы потенциальных возбудителей (токсоплазма, листерия, ВПГ 1 и 2 типа, ЦМВ, ВЭБ) методом ПЦР.

Диагностическое обследование новорожденных детей и детей раннего возраста с признаками внутриутробной инфекции или родившихся от матерей с острым или хроническим (при наличии реактивации во время беременности) токсоплазмозом.

Отрицательный результат выявления ДНК токсоплазмы методом ПЦР не исключает ранее произошедшего инфицирования или наличия очага в мозге вдали от ликворонесущих путей. Для диагностики токсоплазмоза требуется дополнительное исследование сыворотки (плазмы) крови для выявления АТ-токсо IgM и АТтоксо IgА, при поражении мозга – параллельное исследование СМЖ и сыворотки (плазмы) крови для выявления АТ-токсо IgА и IgG.

При отсутствии возможности проведения ПЦР-исследования у ребенка необходимо определение АТ-токсо IgM и IgА.

Отсутствие АТ-токсо IgM при наличии АТ-токсо IgG не дает основание исключить внутриутробное заражение и требует определения ДНК токсоплазм либо АТтоксо IgА.

Обнаружение АТ-токсо IgА имеет высокое диагностическое значение и свидетельствует о заражении ребенка.

Обнаружение у новорожденного АТ IgG может быть обусловлено передачей их через плаценту от матери, что затрудняет диагностику врожденного токсоплазмоза. К 4 мес после рождения концентрация АТ-токсо IgG резко снижается ввиду распада материнских АТ. В случае заражения вскоре после рождения концентрация АТ IgG, вырабатываемых организмом ребенка, нарастает, однако в первом полугодии жизни «маскируется» уровнем материнских АТ. Повышение уровня АТ IgG во втором полугодии жизни можно рассматривать как показатель инфицирования ребенка, но в ряде случаев (у недоношенных и иммунодефицитных детей) даже при появлении симптомов (чаще всего со стороны ЦНС) резкого подъема АТ не наблюдается.

Рецидивы перинатальной инфекции (хориоретинит, поражение ЦНС с формированием гидроцефалии) могут иметь место в любом возрасте и сопровождаются усиленной продукцией АТ IgA (редко – IgМ) к токсоплазмам.

При поражении мозга (менингоэнцефалит, энцефалит, прогрессирующая гидроцефалия, кальцификаты, кисты мозга) АТ-токсо IgG целесообразно определять одновременно в СМЖ и сыворотке крови. При локальном поражении мозга уровень АТ в СМЖ значительно выше, и, рассчитав соотношение уровня АТ, можно подтвердить (или исключить) поражение мозга токсоплазмами.

Диагностическое обследование больных ВИЧ-инфекцией показано на ранних стадиях перед назначением первичной профилактики токсоплазмоза, которая проводится при числе CD 4+ менее 0,1.109 и включает определение АТ-токсо АТ IgG. Обследование больных ВИЧ-инфекцией на поздних стадиях показано при развитии симптомов поражения ЦНС (желательно проведение МРТ) и при подозрении на церебральный токсоплазмоз (наиболее частое поражением ЦНС у больных СПИДом). В этих случаях диагностическое значение имеет присутствие АТ-токсо IgG в крови в высоких и средних титрах (или их нарастание в динамике). Обнаружение в сыворотке крови АТ-токсо без определения их титра позволяет судить лишь об инфицировании и не может быть рекомендовано для подтверждения диагноза.

При церебральном токсоплазмозе у больных ВИЧ-инфекцией клиническая чувствительность обнаружения АТ IgM в крови и АТ IgG в СМЖ очень низкая. АТ IgM в крови выявляют редко (только при свежем инфицировании, что бывает лишь в 1-2% случаев), АТ IgG в СМЖ определяют не более чем в 5% случаев. Диагностическое значение имеет наличие специфических АТ IgG в крови в высоких и средних титрах (или их нарастание в динамике). Однако на фоне очень глубокого подавления иммунитета примерно у 5% пациентов эти АТ не обнаруживаются. Тем не менее, отрицательный результат исследования или низкие титры АТ IgG не исключают диагноза церебрального токсоплазмоза и не должны быть причиной отказа от начала эмпирического лечения. Использование ПЦР в диагностике церебрального токсоплазмоза продемонстрировало, что диагностическая чувствительность определения ДНК T. gondii в СМЖ составляет 30% при 100% специфичности. Таким образом, положительный результат ПЦР всего лишь констатирует зараженность индивидуума, но не может достоверно подтвердить токсоплазмозную этиологию поражения ЦНС.