Пневмококки таксономия. Микробиологическая диагностика пневмококковых инфекций. Как пневмококк может серьезно навредить здоровью человека, или что ослабляет иммунную систему

Научная классификация стафилококка:
Домен:
Тип: Firmicutes (фирмикуты)
Класс: Бациллы
Порядок: Lactobacillales (Лактобациллы)
Семейство: Streptococcaceae (Стрептококковые)
Вид: Пневмококк (Streptococcus pneumoniae)
Международное научное название: Streptococcus pneumoniae

Пневмококк (лат. Streptococcus pneumoniae) – это бактерия шарообразной или яйцеподобной формы, принадлежащая к семейству Стрептококковые (Streptococcaceae).

Другие названия пневмококка: диплококк Вейксельбаума, диплококк Френкеля.

Пневмококк является наиболее частым возбудителем такого заболевания, как – . Смертность пневмонии составляет до 5% случаев. Среди других заболеваний пневмококковой этиологии можно выделить – отит, синуситы, ларингит, трахеит, бронхит, менингит, сепсис и другие. Особенно пневмококковая инфекция часто становиться причиной обострения бронхо-легочных заболеваний у детей.

Характеристика стрептококков

Как и другие виды стрептококков, пневмококки чаще всего существуют парами, иногда выстраиваясь в цепочки. Размер бактерии составляет 0,5-1,25 мкм. По поведению, пневмококковая инфекция неподвижная, анаэробная, грамположительная. Стремительное размножение происходит при увеличении углекислого газа. Основой пневмококка является пептидогликан, в совокупности с поверхностными белками, углеводами, липопротеинами и тейхоевыми кислотами, и все это находиться в защитной мощной полисахаридной капсуле, предотвращающей опсонизации.

Классификация пневмококков насчитывает до 100 штаммов данных бактерий.

Заболевания, которые способны вызвать пневмококки

Наиболее популярными заболеваниями пневмококковой природы являются:

• Септический артрит;
• Средний отит;
• (ринит (насморк), гайморит, этмоидит, сфеноидит и фронтит);
• Пневмония (внебольничная);

Наиболее же популярными пневмококковыми заболеваниями являются – пневмония (около 70%), средний отит (около 25%), менингит (от 5 до 15%) и эндокардит (около 3%).

Кроме того, пневмококковая инфекция может присоединиться к уже имеющимся заболеваниями других видов инфекции – , и т.д.

Как инактивировать пневмококк?

Бактерия пневмококк погибает при:

• их обработке растворами антисептиков и дезинфектантов;
• воздействии антибактериальных средств.

Как передается пневмококк? Условия, при которых человек начинает заболевать пневмококковыми болезнями, обычно состоят из двух частей – контакт с инфекцией и ослабленный иммунитет. Однако, человек может серьезно заболеть и при обычном контакте с данным видом бактерий, когда ее количество в воздухе составляет большую концентрацию.

Рассмотрим наиболее популярные пути заражения пневмококковой инфекцией:

Как пневмококк может попасть в организм?

Воздушно-капельный путь. Основной путь заражения пневмококковой инфекцией — воздушно-капельный. Кашель и рядом стоящего человека это и есть первопричины большинства . Коварность пневмококковой инфекции заключается в том, что ее носитель часто сам не ведает о своей роли, т.к. она может не вызывать каких-либо симптомов у своего носителя. Также стоит отметить, что в период , в воздухе, особенно в закрытых помещениях, концентрация , и других видов возрастает. Именно поэтому, первыми жертвами становятся лица, часто пребывающие или работающие в местах большого скопления людей.

Воздушно-пылевой путь. Пыль, в том числе домашняя, состоит из многих частичек – пыльца растений, шерсть животных, частички слущенной кожи и бумаги, а также – вирусы, бактерии, грибки и другая инфекция. Нахождение человека в помещениях, где мало или редко убирается, это еще один фактор, способствующий инфицированию.

Контактно-бытовой путь. Большинство видов инфекции сами по себе не умирают, поэтому, совместной с больным человеком использование одних и тех же кухонных принадлежностей и предметов личной гигиены увеличивает риск заболеть.

Гематогенный путь. Заражение происходит при контакте крови человека с инфицированным предметом. Частыми пациентами становятся лица, употребляющие инъекционные наркотики.

Медицинский путь. Заражение происходит при использовании, например при плановом осмотре, загрязненного медицинского оборудования/инструментов.

Как пневмококк может серьезно навредить здоровью человека, или что ослабляет иммунную систему?

Как мы и говорили, вторым фактором, который способствует развитию пневмококкового заболевания – ослабленная иммунная система, которая выполняет защитную функцию организма. Так, при попадание инфекции в организм, иммунитет вырабатывает специальные антитела, которые достигая очага инфицирования или оседания инфекции, купируют ее и уничтожают. Если иммунитет ослаблен, бороться с инфекцией некому, разве лекарственные средства.

Рассмотрим основные причины ослабленного иммунитета:

• Наличие хронических болезней — любое заболевание в организме хронической формы говорит о том, что иммунная система с ним не может самостоятельно справиться, в то время как болезнь постепенно продолжает вредить здоровью;
• Наличие других инфекционных болезней – , синуситы, бронхо-легочные болезни, ;
• Недостаточное количество в организме витаминов и минералов ();
• Вредные привычки – курение, наркотические средства;
• Малоподвижный образ жизни;
• Отсутствие здорового сна, хроническая усталость;
• Злоупотребление некоторыми лекарственными препаратами, особенно – антибиотиками;
• Очень часто пневмококковую инфекцию в дом приносят дети – со школы и садика. Этому способствует тесный контакт между собой детей, а также не до конца развитый иммунитет. Далее, если в доме не соблюдать определенные профилактически меры, заболевание развивается и у взрослых.

Группы риска

Рассмотрим группу людей, у которых повышены риски, заразиться пневмококковыми заболеваниями:

• Люди преклонного возраста, от 60 лет и дети;
• Лица, работающие в местах большого скопления людей – офисные сотрудники, водители и кондукторы общественного транспорта, работники крупных предприятий, работники медучреждений, работники домов для престарелых и учебных заведений, военнослужащие.
• Люди, у которых присутствуют хронические заболевания , и систем, а также такие заболевания, как – сахарный диабет, эмфизема, заболевания почек, ВИЧ.
• Лица, употребляющие алкогольные напитки, курильщики.
• Лица, любящие ходить в морозную и/или прохладную сырую погоду без головного убора, в коротких куртках, тонких брюках и другой одежде, из-за которой организм подвергается переохлаждению.
• Лица, переболевшие другими инфекционными заболеваниями – ОРВИ, ОРЗ, грипп, и другие.

Симптомы пневмококка

Симптомы (клиническая картина) пневмококковых болезней весьма обширны, и во многом зависят от места (органа) в котором произошло оседание инфекции, штамма пневмококка, здоровья человека и состояния его иммунитета.

Общими симптомами пневмококка могут быть:

• , недомогание, и ;
• Затрудненное дыхание, чиханье, одышка;
• Повышенная и высокая температура тела, ;
• , иногда сильная;
• , нарушение сознания;
• Светобоязнь;
• Нарушение обоняния;
• , иногда с ;
• Все виды – , и ;
• Болезни дыхательной системы: , фарингит, ларингит, трахеит, бронхит и пневмония;

Осложнения пневмококка:

• Воспаление сердечной мышцы - , эндокардит, ;
• Гнойный отит;
• Снижение или потеря голоса, или слуха;
• Абсцесс легких;
• Сепсис;
• Задержка умственного развития;
• Скованность движений;
• Эпилепсия;
• Летальный исход.

Важно! Некоторые клинические осложненные проявления иногда могут сопровождать человека остаток его жизни.

Диагностика пневмококка

Анализ на пневмококк обычно берется из мазков, взятых из ротоглотки (при заболеваниях верхних дыхательных путей), мокроты из носа и крови.

Таким образом, выделяют следующие анализы и методы обследования организма при пневмококковой инфекции:

• Бактериологический посев мокроты и мазков, взятых из носовой полости и ротоглотки;
• внутренних органов;
• легких;

Как лечить пневмококк? Лечение пневмококка обычно состоит из нескольких пунктов:

1. Антибактериальная терапия;
2. Укрепление иммунной системы;
3. Восстановление нормальной микрофлоры кишечника, которая обычно нарушается при применении антибактериальных препаратов;
4. Детоксикация организма;
5. Антигистаминные препараты – назначаются детям, при аллергии на антибиотики;
6. Симптоматическая терапия;
7. При одновременном заболевании и другими болезнями, производится и их лечение.

Лечение болезней пневмококковой природы в любом случае начинается с посещения врача и прохождения больным диагностики. Это необходимо сделать для исключения других видов инфекции, а также проверки резистентности (восприимчивости) инфекции к тому или иному антибактериальному препарату.

Перед рассмотрением антибиотиков при пневмококковых болезнях, рассмотрим их взаимодействие (резистентность).

Устойчивость к антибиотикам

Врачи отмечают не очень благоприятную тенденцию к лечению пневмококковой инфекции. Так, из года в год, по всему миру, замечена устойчивость (резистентность) пневмококков к антибактериальным препаратам пенициллинового и тетрациклинового ряда, а также макролидам, причем невосприимчивость к антибиотикам постепенно возрастает. Наиболее резистентными пневмококки находятся в Америке, в Западной Европе, Азии, наименее в Германии, Нидерландам. Если говорить о поверхностных причинах, то этому во многом поспособствовала доступность антибиотиков любому человеку, даже без рецептов. Дело в том, что неправильно-подобранные антибиотики, или же курс терапии данной группой препаратов, способствуют выработке инфекцией определенной невосприимчивости к этим препаратам в дальнейшем, бактерии мутируют, развиваются их новые штаммы. В некоторых странах, в той же Германии, как раз нельзя приобрести антибиотики без рецепта врача, и потому, многие инфекционные заболевания бактериальной природы более легко поддаются лечению, а количество осложнений, и соответственно смертельных исходов гораздо меньше.

Наиболее высокая резистентность пневмококков на территориях России и Украины наблюдается по отношению к тетрациклину (40%) и ко-тримоксазолу (50%).

1. Антибактериальная терапия

Важно! Перед применением антибиотиков обязательно проконсультируйтесь с лечащим врачом.

В скобках, после наименования антибиотика, указан процент устойчивости бактерии к препарату (на территории России, по состоянию на 2002—2012 г).

Антибиотики против пневмококков для внутреннего применения: «Амоксициллин» и «Амоксициллин-Клавуланат» (0,5 %), «Ванкомицин» (1%), «Левофлоксацин» (1%), «Рифампицин» (1%), «Клиндамицин» (2%), «Цефотаксим» (2%), «Цефепим» (2%), «Ципрофлоксацин» (2%), макролиды (от 7 до 26% — « », «Кларитомицин», «Мидекамицин», «Спирамицин», « »), Хлорамфеникол (5%), «Пенициллин» (29%), « » (40%), «Ко-тримоксазол» (50%).

Курс антибактериальной терапии назначается индивидуально, лечащим врачом. Обычно он составляет 5-10 дней.

Антибиотики против пневмококков для местного применения: «Биопарокс», «Гексорал».

Важно! Часто врач для лечения заболевания подбирает комбинацию из 2 антибактериальных препаратов, которые необходимо принимать одновременно.

2. Укрепление иммунной системы

Для укрепления иммунитета и стимулирования его работы, в комплексе с антибиотиками назначают прием – иммунностимуляторы: «Иммунал», «ИРС-19», «Имудон».

Природным иммуностимулятором является , который в большом количестве присутствует в составе , клюквы, и облепихи.

3. Восстановление нормальной микрофлоры кишечника

Во время приема антибактериальных препаратов, они также попадая внутрь кишечника, уничтожают полезную микрофлору, способствующую нормальному усваиванию пищи и участвующей в других важных процессах жизнедеятельности организма. Поэтому, при приеме антибактериальных препаратов, в последнее время все большую популярность приобретает прием и пробиотиков, которые восстанавливают нормальную микрофлору кишечника.

Среди пробиотиков можно выделить: «Аципол», «Бифиформ», «Линекс».

4. Детоксикация организма

Пневмококковая инфекция, во время пребывания внутри организма, отравляет его продуктами своей жизнедеятельности. Интоксикация инфекционными ферментами способствует ухудшению течения заболевания, вызывая такие симптомы, как – тошнота, рвота, потеря сил, галлюцинации и бредение.

Для выведения продуктов жизнедеятельности инфекции из организма, назначается детоксикационная терапия, которая включает в себя:

• обильное питье (до 3 л жидкости в сутки, желательно с добавлением витамина С);
• полоскание носа и ротоглотки слабо-соляным раствором или раствором фурациллина;
• приеме детоксикационных препаратов: «Атоксил», «Альбумин», «Энтеросгель».

5. Антигистаминные препараты

Антигистаминные препараты назначаются в случае, если при приеме антибиотиков у человека проявляется аллергическая реакция – зуд кожи, сыпь, покраснения и другие проявления.

Среди антигистаминных препаратов можно выделить: « », « », «Цетрин».

6. Симптоматическая терапия

Для купирования симптоматики пневмококковых болезней и облегчения их течения, назначается симптоматическая терапия.

При высокой температуре тела: прохладные компрессы на лоб, шею, запястья, подмышки. Среди препаратов можно выделить — « », « ».

При заложенности носа — сосудосуживающие препараты: «Нокспрей», «Фармазолин».

Важно! Перед применением народных средств обязательно проконсультируйтесь с врачом.

Скарлатину вызывают различные серотипы бета - гемолитических стрептококков, обладающих М- антигеном и продуцирующих эритрогенин (токсигенные стрептококки серогруппы А) - (Streptococcus pyogenes) . При отсутствии антитоксического иммунитета возникает скарлатина, при наличии - ангина.

Клиническая картина

 Интоксикация - лихорадка, общее недомогание, головные боли.

 Скарлатиновая сыпь - мелкоточечная, при умеренном нажатии стеклянным шпателем пятнышки видны чётче. При более сильном нажатии сыпь уступает место золотисто-желтоватому оттенку кожи. Выступает на 1-3 день болезни и локализуется главным образом на щеках, в паху, по бокам туловища. Кожа носогубного треугольника остается бледной и свободной от сыпи. Сыпь обычно держится 3-7 дней, затем угасает, не оставляя пигментации. Характерно сгущение сыпи на сгибах конечностей - подмышечной, локтевой, подколенной областях.

 Скарлатиновый язык - на 2-4 день болезни язык больного становится выражено зернистым, ярко-красного цвета, так называемый "малиновый" язык.

 Ангина - постоянный симптом скарлатины. Может протекать тяжелее обычной ангины.

 Шелушение кожи - возникает после исчезновения сыпи (через 14 дней от начала заболевания): в области ладоней и стоп оно крупнопластинчатое, начинается с кончиков пальцев; на туловище, шее, ушных раковинах шелушение отрубевидное.

Пневмококки, таксономия. Свойства. Серологические группы. Отличительные признаки от других стрептококков. Вызываемые заболевания. Принципы и методы лабораторной диагностики.

Морфология и биологические свойства. Пневмококки (Streptococcus pneumoniae) представляют собой парно расположенные кокки овальной, слегка вытянутой ланцетовидной формы, напоминающие пламя свечи. Они могут располагаться также короткими цепочками, напоминая стрептококки. Неподвижны, спор не образуют, грамположительны.
Выращивают их на средах с добавлением белка: кровяных, сывороточных, с асцитической жидкостью. На кровяном агаре колонии пневмококков мелкие, напоминающие росинки, прозрачные в проходящем свете, с вдавленным центром, окружены зоной неполного гемолиза, зеленоватого оттенка, сходные с колониями зеленящего стрептококка. На жидких средах дают нежное помутнение, иногда образуя осадок. Биохимически довольно активны: разлагают глюкозу, лактозу, мальтозу, инулин и другие углеводы с образованием кислоты, не разжижают желатина, не образуют индола. Расщепление инулина является дифференциально-диагностическим признаком, помогающим отличить пневмококки от стрептококков, которые инулин не разлагают. Важным отличительным признаком служит способность пневмококков растворяться в желчи, в то время как стрептококки хорошо в ней сохраняются.

Патогенез и клиника. Пневмококки являются возбудителями крупозной пневмонии у человека. Они могут также вызывать ползучую язву роговицы, катары верхних дыхательных путей, менингит, эндокардит, поражения суставов и другие заболевания.

После перенесенного заболевания иммунитет малонапряженный, кратковременный, типоспецифический.
Микробиологическая диагностика. Материалом для исследования являются мокрота, кровь, мазок из зева, спинномозговая жидкость. Ввиду того что пневмококк быстро погибает, патологический материал необходимо как можно скорее доставить в лабораторию для исследования.

Менингококки. Таксономия, свойства. Антигенная структура менингококков, классификация. Патогенез менингококковой инфекции, клинические проявления. Принципы и методы микробиологической диагностики. Дифференциация возбудителя менингококковой инфекции и других менингококков. Специфическая профилактика.

N.meningitidis (менингококки).

Менингококк - возбудитель менингококковой инфекции - строгого антропоноза с воздушно - капельной передачей возбудителя. Основной источник - носители. Природный резервуар - носоглотка человека. Морфологические, культуральные и биохимические свойства аналогичны гонококку. Отличия - ферментируют не только глюкозу, но и мальтозу, продуцируют гемолизин. Обладают капсулой, имеющей большие размеры и другое строение, чем у гонококка.

Антигенный состав. Имеют четыре основные антигенные системы.

1. Капсульные группоспецифические полисахаридные антигены. Штаммы серогруппы А наиболее часто вызывают эпидемические вспышки.

2. Белковые антигены наружной мембраны. По этим антигенам менингококки серогрупп В и С подразделены на классы и серотипы.

3. Родо- и видоспецифические антигены.

4. Липополисахаридные антигены (8 типов). Имеют высокую токсичность, вызывают пирогенное действие.

Факторы патогенности. Факторы адгезии и колонизация - пили и белки наружной мембраны. Факторы инвазивности - гиалуронидаза и другие продуцируемые ферменты (нейраминидаза, протеазы, фибринолизин). Большое значение имеют капсульные полисахаридные антигены, защищающие микроорганизмы от фагоцитоза.

Иммунитет стойкий, антимикробный.

Лабораторная диагностика основана на бактериоскопии, выделении культуры и ее биохимической идентификации, серологических методах диагностики. Посев материала производят на твердые и полужидкие питательные среды, содержащие кровь, асцитическую жидкость, сыворотку крови.

Оксидаза- позитивные культуры рассматривают как принадлежащие к роду Neisseria. Для менингококка характерна ферментация глюкозы и мальтозы. Принадлежность к серогруппе определяют в реакции агглютинации (РА).

Гонококки. Таксономия, свойства. Патогенез гонококковой инфекции, особенности иммунитета. Принципы и методы лабораторной диагностики острой и хронической гонореи, бленнореи. РСК Борде-Жангу, назначение, механизм, учет реакции. Профилактика бленнореи у новорожденных. Профилактика и лечение гонореи. Специфическая терапия.

N.gonorrheae (гонококк).

Гонококк - возбудитель гонореи - венерического заболевания с воспалительными проявлениями в мочеполовых путях. Субстрат для колонизации - эпителий уретры, прямой кишки, конъюнктивы глаза, глотки, шейки матки, маточных труб и яичника.

Диплококки, хорошо окрашиваемые метиленовым синим и другими анилиновыми красителями, плеоморфные (полиморфизм). Очень прихотливы к условиям культивирования и питательным средам. Из углеводов ферментируют только глюкозу.

Антигенная структура очень изменчива - характерны фазовые вариации (исчезновение антигенных детерминант) и антигенные вариации (изменение антигенных детерминант).

Факторы патогенности. Основными факторами являются пили , с помощью которых гонококки осуществляют адгезию и колонизацию эпителиальных клеток слизистой оболочки моче- половых путей, и липополисахарид (эндотоксин, освобождающийся при разрушении гонококков). Гонококки синтезируют IgAI- протеазу, расщепляющую IgA.

Лабораторная диагностика. Бактериоскопическая диагностика включает окраску по Граму и метиленовым синим. Типичные признаки гонококка - грамотрицательная окраска, бобовидные диплококки, внутриклеточная локализация.

Посев производят на специальные среды (КДС- МПА из мяса кролика или бычьего сердца с сывороткой, асцит- агар, кровяной агар).

Возбудители газовой анаэробной инфекции. Таксономия. Свойства. Характеристика токсинов. Патогенез, клинические формы. Принципы и методы лабораторной диагностики, препараты специфической профилактики и лечения.

Газовая гангрена - анаэробная поликлостридиальная (т.е. вызываемая различными видами клостридий) раневая (травматическая) инфекция. Основное значение имеет C.perfringens, реже - C.novyi, а также другие виды клостридий в стойких ассоциациях между собой, аэробными гноеродными кокками и гнилостными анаэробными бактериями.

C.perfringens - нормальный обитатель кишечников человека и животных, в почву попадает с испражнениями. Является возбудителем раневой инфекции - вызывает заболевание при попадании возбудителя в анаэробных условиях в раны. Обладает высокой инвазивностью и токсигенностью. Инвазивность связана с выработкой гиалуронидазы и других ферментов, оказывающих разрушающее действие на мышечную и соединительную ткани. Главный фактор патогенности - экзотоксин , оказывающий гемо-, некро-, нейро-, лейкотоксическое и летальное воздействие. В соответствии с антигенной специфичностью экзотоксинов выделяют серотипы возбудителя. Наряду с газовой гангреной C.perfringens вызывает пищевые токсикоинфекции (в их основе - действие энтеротоксинов и некротоксинов).

Особенности патогенеза. В отличии от гнойных заболеваний, вызываемых аэробами, при анаэробной инфекции преобладает не воспаление, а некроз, отек, газообразование в тканях, отравление токсинами и продуктами распада тканей.

Иммунитет - преимущественно антитоксический.

Лабораторная диагностика включает бактериоскопию отделяемого ран, выделение и идентификацию возбудителя, выявление и идентификацию токсина в биопробах с использованием реакции нейтрализации специфическими антитоксическими антителами.

Профилактика и лечение. В основе предупреждения газовой гангрены - своевременная и правильная хирургическая обработка ран. При тяжелых ранениях вводят антитоксические сыворотки против основных видов клостридий по 10 тысяч МЕ, в лечебных целях - по 50 тысяч МЕ.

Клостридии столбняка. Таксономия. Свойства, характеристика токсинов. Патогенез заболевания. Нисходящий столбняк. Клиника. Принципы и методы лабораторной диагностики. Цель бактериологического исследования, препараты специфической профилактики и лечения.

Столбняк - острая раневая инфекция, характеризующаяся поражением нейротоксином двигательных клеток спинного и головного мозга, которое проявляется в виде судорог поперечно - полосатой мускулатуры. Болеют люди и сельскохозяйственные животные. Почва, особенно загрязненная испражнениями человека и животных, является постоянным источником заражения столбняком.

Возбудитель - C.tetani - крупная спорообразующая грамположительная палочка. Споры располагаются терминально (вид барабанной палочки), подвижна за счет жгутиков - перитрихов. Обязательный анаэроб. Споры обладают очень высокой устойчивостью.

Антигенные свойства. Возбудитель имеет О- и Н- антигены.

Факторы патогенности. Главный фактор - сильнейший экзотоксин. Выделяют две его основные фракции - тетаноспазмин (нейротоксин) и тетанолизин (гемолизин). Нейротоксин в центральную нервную систему проникает в области мионевральных синапсов, передается от нейрона к нейрону в области синапсов, накапливается в двигательных зонах спинного и головного могза, блокирует синаптическую передачу. Смерть наступает от паралича дыхательного центра, асфиксии (поражение мышц гортани, диафрагмы, межреберных мышц) или паралича сердца.

Лабораторная диагностика. Микробиологическая диагностика включает бактериоскопию исходных материалов, посев для выделения возбудителя и его идентификацию, обнаружение столбнячного токсина.

Выделение возбудителя проводят по стандартной для анаэробов схеме, используя различные плотные и жидкие (среда Китта - Тароцци) среды, идентификацию - на основе морфологических, культуральных, биохимических и токсигенных свойств.

Наиболее простой и эффективный метод микробиологической диагностики - биопроба на белых мышах. Одну группу заражают исследуемым материалом, вторую (контрольную) - после смешивания проб с антитоксической столбнячной сывороткой. При наличии столбнячного токсина опытная группа мышей погибает, контрольная - остается живой.

Лечение и экстренная профилактика. Используют донорский противостолбнячный иммуноглобулин (антитоксин), антитоксическую сыворотку (350МЕ/кг), антибиотики (пенициллины, цефалоспорины). Для создания вакцинального иммунитета используют столбнячный анатоксин, чаще в составе АКДС вакцины (анатоксины столбняка, дифтерии и убитые коклюшные палочки).

Клостридии ботулизма. Таксономия. Свойства. Характеристика токсинов, отличие от экзотоксинов возбудителей других пищевых инфекций. Принципы и методы лабораторной диагностики. Препараты специфической профилактики и лечения.

Ботулизм - тяжелая пищевая токсикоинфекция, связанная с употреблением продуктов, зараженных C.botulinum, и характеризующаяся специфическим поражением центральной нервной системы. Свое название получила от лат. botulus - колбаса.

Свойства возбудителя. Крупные полиморфные грамположительные палочки, подвижные, имеют перитрихиальные жгутики. Споры овальные, располагаются субтерминально (тенисная ракетка). Образуют восемь типов токсинов, отличающихся по антигенной специфичности, и соответственно выделяют 8 типов возбудителя. Среди важнейших характеристик - наличие или отсутствие протеолитических свойств (гидролиз казеина, продукция сероводорода).

Токсин оказывает нейротоксическое действие. Токсин попадает в организм с пищей, хотя вероятно может накапливаться при размножении возбудителя в тканях организма. Токсин термолабильный, хотя для полной инактивации необходимо кипячение до 20 мин. Токсин быстро всасывается в желудочно - кишечном тракте, проникает в кровь, избирательно действует на ядра продолговатого мозга и ганглиозные клетки спинного мозга. Развиваются нервно - паралитические явления - нарушения глотания, афония, дисфагия, офтальмо - плегический синдром (косоглазие, двоение в глазах, опущение век), параличи и парезы глоточных и гортанных мышц, остановка дыхания и сердечной деятельности.

Лабораторная диагностика. Принципы - общие для клостридий.

Лечение и профилактика. В основе - раннее применение антитоксических сывороток (поливалентных или при установлении типа - гомологичных). В основе профилактики - санитарно - гигиенический режим при обработке пищевых продуктов. Особенно опасны грибные консервы домашнего приготовления и другие продукты, хранящиеся в анаэробных условиях.

11. Синегнойная палочка. Таксономия. Свойства. Вызываемые заболевания.
Роль во внутрибольничных инфекциях. Принципы и методы лабораторной диагностики.

Род pseudomonas, P. aeruginosa (синегнойная палочка) - один из основных возбудителей локальных и системных гнойно - воспалительных процессов в условиях медицинских стационаров.

Возбудитель распространен повсеместно (вода, почва, растения, животные), встречается в норме у человека (наиболее часто - в кишечнике, на коже и слизистых). Морфология - грамотрицательная прямая или слегка изогнутая палочка, подвижна, в мазках располагается одиночно, парами или короткими цепочками. Синтезирует слизь (капсульное вещество), особенно более вирулентные мукоидные штаммы.

Культуральные свойства. Является аэробом и обладает соответствующим типу дыхания набором ферментов (цитохромы, цитохромоксидаза, дегидразы. На жидких средах образует серовато - серебристую пленку. На плотных средах часто наблюдается феномен радужного лизиса. Уже к концу суток вследствие синтеза пигментапиоцианина появляется сине - зеленое окрашивание культуры.

Биохимические свойства. Для синегнойной палочки характерна низкая сахаролитическая активность (окисляет только глюкозу), высокая протеолитическая активность и образование на кровяном агаре зоны бета- гемолиза. Синтезирует триметиламин, придающий культурам приятный запах жасмина. Продуцирует выработку бактериоцинов - пиоцинов .

Антигенные и патогенные свойства. Основные антигены синегнойной палочки - группоспецифический соматический О- антиген и типоспецифический жгутиковый Н- антиген. О- антигенный комплекс - агрегат ЛПС с белками и липидами клеточной стенки, обладает свойствами эндотоксина, является одним из главных факторов патогенности. Синегнойная палочка обладает большим набором факторов патогенности - эндотоксином (ЛПС, аналогичный другим грамотрицательным бактериям), рядом экзотоксинов - цитотоксином, экзоэнзимом S, гемолизинами, экзотоксином А (наиболее важный, напоминает дифтерийный экзотоксин), ферментами (коллагеназой, нейраминидазой, протеазами).

Лабораторная диагностика. Свое название P.aeruginisa получила за голубовато - зеленое окрашивание отделяемого ран и перевязочного материала. Основным методом диагностики является бактериологический. Важным является обнаружение пигмента пиоцианина. Лечение и специфическая профилактика. Специфической профилактики нет. При пищевых токсикоинфекциях и дисбактериозах кишечника, вызванных синегнойной палочкой, эффективен комплексный интести - бактериофаг, в состав которого входит псевдомонадный фаг. Из антибактериальных препаратов чаще применяют аминогликозиды, цефалоспорины и хинолоны.

Условно-патогенные грамотрицательные бактерии - возбудители гнойно-воспалительных процессов (Протей, клебсиеллы, чудесная палочка и др.), таксономия. Общая характеристика энтеробактерий. Принципы и методы лабораторной диагностики.

Род Klebsiella.

Род Klebsiella относится к семейству энтеробактерий. Особенность представителей рода - способность образовывать капсулу. Основной вид - K. Pneumoniae. Вызывают оппортунистические поражения - госпитальные пневмонии, инфекции мочевыводящих путей, диареи у новорожденных. Клебсиеллы вызывают маститы, септицемии и пневмонии у животных, постоянно обнаруживаются на коже и слизистых оболочках человека и животных. Клебсиеллы - прямые неподвижные палочки различных размеров. Факультативные анаэробы. Оксидаза - отрицательны, каталаза- положительны.

Факторы патогенности. К ним относят полисахаридную капсулу (К- антиген), эндотоксин, фимбрии, сидерофорную систему (связывает ионы двухвалентного железа и снижает их содержание в тканях), термолабильные и термостабильные экзотоксины.

Клинические проявления. Для K.pneumoniae (subsp. pneumoniae) характерны госпитальные бронхиты и бронхопневмонии, долевые пневмонии, инфекции мочевыводящих путей, поражения мозговых оболочек, суставов, позвоночника, глаз, а также бактеремии и септикопиемии. Подвид ozaenae вызывает особую форму хронического атрофического ринита - озену .

Лабораторная диагностика. Основной метод - бактериологический. Лечение. Одна из особенностей клебсиелл - их множественная лекарственная устойчивость и развитие поражений на фоне снижения резистентности организма. Антибиотики применяют при генерализованных и вялотекущих хронических формах клебсиеллезов как правило в сочетании с препаратами, стимулирующими иммунитет.

Род Proteus.

Род Proteus относится к семейству энтеробактерий. Род получил название в честь сына Посейдона Протея, способного менять свой облик. Представители рода способны менять внешние проявления роста на плотных питательных средах, а также отличаются наибольшим плеоморфизмом (изменчивостью морфологии) по сравнению с другими энтеробактериями.

Протеи расщепляют тирозин, восстанавливают нитраты, оксидаза - отрицательны, каталаза - положительны. Они обитают в кишечниках многих видов позвоночных и безпозвоночных животных, почве, сточных водах, разлагающихся органических остатках. Могут вызывать инфекции мочевыводящих путей у человека, а также септические поражения у пациентов с ожогами и после хирургических вмешательств. Достаточно часто вызывают также пищевые токсикоинфекции. Наиболее часто роль в патологии имеют P.vulgaris и P.mirabilis.

Культуральные свойства. Протеи растут на простых средах в широком диапозоне температур. Оптимальная рН - 7,2-7,4, температура - от +35 до 37 градусов Цельсия. Колонии протеев в О- форме округлые, полупрозначные и выпуклые, Н- формы дают сплошной рост. Рост протеев сопровождается гнилостным запахом. Характерен феномер роения, Н- формы дают на МПА характерный ползучий рост в виде голубовато - дымчатой нежной вуали. При посеве по методу Шушкевича в конденсационную влагу свежескошенного МПА культура постепенно поднимается в виде вуали вверх по поверхности агара. На МПБ отмечают диффузное помутнение среды с густым белым осадком на дне.

Факторы патогенности. К ним относят ЛПС клеточной стенки, способность к “роению”, фимбрии, протеазы и уреазу, гемолизины и гемагглютинины.

Лабораторная диагностика. Основной метод - бактериологический. Используют дифференциально - диагностические среды (Плоскирева), среды обогащения и МПА по методу Шушкевича. Лечение. При дисбактериозах кишечника, связанных с протеями (колиты), можно использовать протейный фаг и препараты, в состав которых он входит (интести- фаг, коли- протейный бактериофаг).

«Чудесная палочка» (Serratia marcescens), вид бактерий из числа пигментных микроорганизмов. Грамотрицательные подвижные (перитрихи) неспороносные палочки. По типу обмена - факультативный анаэроб. На поверхности агара образует гладкие или зернистые темно- и ярко-красные колонии с металлическим блеском. Обитает в почве, воде, на пищевых продуктах. Развиваясь на хлебе (при повышенной влажности), в молоке, окрашивает их в красный цвет; такие продукты не допускаются к реализации. Условно патогенна для животных и человека; может вызывать нагноения.

13. Эшерихии. Таксономия. Заболевания, вызываемые кишечной палочкой. Патогенные варианты диареегенных эшерихий. Антигенная структура, классификация. Особенности микробиологической диагностики. Дифференцация диареегенных эшерихий от условно-патогенных.

Эшерихии - наиболее распространенные аэробные бактерии кишечника, способные при определенным условиях вызывать обширную группу заболеваний человека, как кишечной (диарея), так и внекишечной (бактеремия, инфекции мочевыводящих путей и др.) локализации. Основной вид - E.coli (кишечная палочка) - самый распространенный возбудитель инфекционных заболеваний, вызываемых энтеробактериями. Этот возбудитель является показателем фекального загрязнения, особенно воды.

Культуральные свойства. На жидких средах E.coli дает диффузное помутнение, на плотных средах образует S- и R- формы колоний. На основной для эшерихий среде Эндо лактозоферментирующие кишечные палочки образуют интенсивно красные колонии с металлическим блеском, не ферментирующие - бледно- розовые или бесцветные колонии с более темным центром, на среде Плоскирева - красные с желтоватым оттенком, на среде Левина - темно- синие с металлическим блеском.

Биохимические свойства. Кишечная палочка в большинстве случаев ферментирует углеводы (глюкозу, лактозу, маннит, арабинозу, галактозу и др.) с образованием кислоты и газа, образует индол, но не образует сероводород, не разжижает желатин.

Основные факторы патогенности диареегенных E.coli.

1. Факторы адгезии, колонизации и инвазии, связанные с пилями, фимбриальными структурами, белками наружной мембраны. Они кодируются плазмидными генами и способствуют колонизации нижних отделов тонкой кишки.

2. Экзотоксины: цитотонины (стимулируют гиперсекрецию клетками кишечника жидкости, нарушают водно - солевой обмен и способствуют развитию диареи) и энтероцитотоксины (действуют на клетки стенки кишечника и эндотелия капилляров).

3. Эндотоксин (липополисахарид).

В зависимости от наличия различных факторов патогенности диареегенные кишечные палочки разделены на пять основных типов: энтеротоксигенные, энтероинвазивные, энтеропатогенные, энтерогеморрагические, энтероадгезивные.

4. Для патогенных кишечных палочек характерна выработка бактериоцинов (колицинов).

Энтеротоксигенные E.coli имеют высокомолекулярный термолабильный токсин, схожий по действию с холерным, вызывают холероподобную диарею (гастроэнтериты у детей младшего возраста, диарею путешественников и др.).

Энтероинвазивные кишечные палочки способны проникать и размножаться в клетках эпителия кишечника. Вызывают профузную диарею с примесью крови и большим количеством лейкоцитов (показатель инвазивного процесса) в испражнениях. Клинически напоминает дизентерию. Штаммы имеют некоторое сходство с шигеллами (неподвижные, не ферментируют лактозу, обладают высокими энтероинвазивными свойствами).

Энтеропатогенные E.coli - основные возбудители диареи у детей. В основе поражений - адгезия бактерий к эпителию кишечника с повреждением микроворсинок. Характерна водянистая диарея и выраженное обезвоживание.

Энтерогеморрагические кишечные палочки вызывают диарею с примесью крови (геморрагический колит), гемолитико - уремический синдром (гемолитическая анемия в сочетании с почечной недостаточностью). Наиболее частый серотип энтерогеморрагических кишечных палочек - О157: Н7.

Энтероадгезивные E.coli не образуют цитотоксины, слабо изучены.

Лабораторная диагностика. Основным подходом является выделение чистой культуры на дифференциально - диагностических средах и ее идентификация по антигенным свойствам. Ставят РА с набором поливалентных ОК (к О- и К- антигенам) сывороток.

Таксономия. Семейство Streptococcaceae, род Streptococcus, вид St. pneumoniae.

Пневмококки впервые описаны Р. Кохом (1871)

Морфология. Пневмококки – это диплококки, у которых стороны клеток, обращенные друг к другу, уплощены, а противоположные стороны вытянуты, поэтому они имеют ланцетовидную форму напоминающую пламя свечи. Размер пневмококков 0,75-0,5 х 0,5-1 мкм, располагаются они парами, в мокроте и гное обнаруживаются единичные кокки или короткие цепочки (4). В жидких питательных средах часто образуют короткие цепочки, приобретая сходство со стрептококками. Пневмококки неподвижны, не имеют спор, в организме человека и животных образуют капсулу, окружающую оба кокка. В капсуле содержится термоустойчивое вещество антифагин. При росте на искусственных питательных средах пневмококки утрачивают способность к капсулообразованию. Пневмококки грамположительны. В старых культурах встречаются грамотрицательные бактерии.

Культивирование. Пневмококки – факультативные анаэробы. Растут при температуре 36-37 о С и рН среды 7,2-7,4. Рост улучшается при повышенном содержании СО 2 , анаэробные условия также усиливают рост пневмококка. Они требовательны к средам, так как не могут синтезировать многие аминокислоты, поэтому растут только на средах с добавлением нативного белка. На агаре с сывороткой образуют мелкие, круглые, нежные, довольно прозрачные колонии, поначалу куполообразные, а при старении – с плоским верхом (центром) и приподнятыми краями. На агаре с кровью вырастают влажные колонии зеленовато-серого цвета, окруженные зеленой зоной, что является результатом перехода гемоглобина в метгемоглобин (α-гемолиз, но он очень сильный и его иногда принимают за β-гемолиз). Пневмококки хорошо растут в бульоне с добавлением 0,2% глюкозы и в бульоне с сывороткой. Рост в жидких средах характеризуется диффузным помутнением и пылевидным осадком на дне. Основную часть энергии пневмококк получает при ферментации глюкозы, при этом образуется большое количество молочной кислоты, которая угнетает рост пневмококка. Поэтому при культивировании пневмококка в сахарном бульоне нужно периодически (через 6 часов после посева) нейтрализовать бульонную культуру щелочью (1N раствором). При старении у пневмококков появляется тенденция к спонтанному лизису (аутолиз – была колония и нет ее, остается только зона гемолиза), который усиливают ПАВ.

Ферментативные свойства . Пневмококки обладают довольно выраженной сахаролитической активностью. Они расщепляют: лактозу, глюкозу, сахарозу, мальтозу, инулин с образованием кислоты, но не ферментируют маннит. Протеолитические свойства у них выражены слабо: молоко они свертывают, желатин не разжижают, индол не образуют. Пневмококки растворяются в 10% бычьей желчи в течение нескольких минут или при добавлении 2% дезоксихолата натрия, легко лизируются ПАВами. Расщепление инулина, растворение в желчи, чувствительность к оптохину (гидрохлорид этилгидрокупреина) являются важными диагностическими признаками, используемыми для дифференциации пневмококка от зеленящего стрептококка.

Токсинообразование и факторы патогенности. Пневмококки образуют эндотоксин, гемолизин, лейкоцидин. Вирулентность пневмококков связана также с наличием в капсуле антифагина. Пневмококки продуцируют гиалуронидазу, фибринолизин и др.

Антигенная структура и классификация . У пневмококков отсутствует полисахаридный антиген в клеточной стенке, поэтому они относятся к негруппируемым стрептококкам. В цитоплазме пневмококков имеется общий для всей группы протеиновый антиген, а в капсуле – полисахаридный антиген. По полисахаридному антигену все пневмококки разделяют на 84 серовара. Среди патогенных для человека наиболее часто встречаются I, II, III серовары. У взрослых до 80% приходится на 1-8 и 18 типы, которые дают более половины летальных сходов при пневмококковой бактериемии, а детей – 6, 14, 19, 23. Любая популяция пневмококка содержит небольшое количество микроорганизмов, которые не продуцируют капсульный полисахарид и часть колоний может быть в R-форме (3-5%).

Устойчивость к факторам окружающей среды . Пневмококки относятся к группе нестойких микроорганизмов. Температура 60 о С губит через 3-5 мин. К низким температурам и высушиванию они довольно устойчивы. В высушенной мокроте сохраняют жизнеспособность до 2 мес. На питательной среде они сохраняются не более 5-6 дней. Поэтому при культивировании необходимо делать пересевы через каждые 2-3 дня. Обычные растворы дезинфицирующих веществ губят их через несколько минут. Устойчивы к гентамицину и мономицину.

Восприимчивость животных . Естественным хозяином пневмококков является человек. Однако пневмококки могут вызвать заболевания у телят, ягнят, поросят, собак и обезьян. Из экспериментальных животных к пневмококку высокочувствительны белые мыши.

Источники инфекции . Больной человек и бактерионоситель (20-40%, до 70% людей являются носителями вирулентных пневмококков).

Пути передачи . Воздушно-капельный путь, может быть воздушно-пылевой.

Входные ворота . Слизистая оболочка верхних дыхательных путей, глаз и уха. Слизистая оболочка человека в норме обладает естественной резистентностью к пневмококку. Снижению ее способствуют патологические изменения дыхательных путей, другие инфекции (вирусные), патологическое скопление слизи (при аллергических заболеваний), закупорка бронхов (при ателектазе), повреждении дыхательных путей раздражающими веществами, алкогольная или лекарственная интоксикация, сосудистые нарушения (отек легких, сердечная недостаточность), нарушение питания, гипохромная анемия.

Заболевания у человека. Пневмококки могут вызвать гнойно-воспалительные заболевания разной локализации. Специфическими для пневмококков являются:

1. Крупозная пневмония

2. Ползучая язва роговицы

Наиболее частым заболеванием является крупозная пневмония, захватывающая одну, реже две или три доли легкого. Заболевание протекает остро, сопровождается высокой температурой, кашлем. Заканчивается обычно критически. Пневмококки-лидеры в этиологии острых пневмоний, эмпиемы легких, могут вызывать синуситы, менингиты и другие заболевания, редко эндокардиты.

Иммунитет. После перенесенного заболевания остается нестойкий иммунитет, так как пневмония характеризуется рецидивами.

Профилактика. Сводится к санитарно-профилактическим мероприятиям. Специфическая профилактика не разработана.

Лечение. Используют антибиотики – пенициллин, тетрациклин и др.

Вопросы для самоконтроля:

1. Как окрашиваются по Граму стрептококки и пневмококки?

2. К какому роду они относятся?

3. Как располагаются в мазках стрептококки?

4. Что по форме напоминают пневмококки?

5. Как располагаются пневмококки в мазках?

6. Подвижны ли стрептококки и пневмококки?

7. При каких условиях пневмококк образует капсулу?

8. Какова роль капсулы у пневмококка?

9. За счет содержания какого вещества в капсуле пневмококка он защищен от фагоцитоза?

10. Требовательны ли стрептококки и пневмококки к питательным средам?

11. Растут ли стрептококки на простых питательных средах?

12. Какие среды используют для культивирования стрептококка и пневмококка?

13. Какие 3 группы стрептококков различают в зависимости от их гемолитической активности?

14. Каков характер роста стрептококка на сахарном или сывороточном бульоне?

15. Какие токсины выделяют стрептококки?

16. Назовите ферменты патогенности, выделяемые стрептококками.

17. Какое количество серогрупп стрептококков по Ленсфильд Вы знаете?

18. Как они обозначаются?

19. Какая серогруппа включает в себя большинство патогенных для человека стрептококков?

20. Какие заболевания, вызываемые St. pyogenes, относят к нагноительным?

21. Назовите ненагноительные заболевания, вызываемые стрептококками группы А.

22. Почему стрептококки группы В считают бичом родильных отделений?

23. По какому признаку стрептококки объединены в группу негруппируемых стрептококков?

24. Кто может быть источником инфекции при стрептококковых инфекциях?

25. Каковы пути передачи заразного начала при этих заболеваниях?

26. В какую серологическую группу включены пневмококки?

27. Растут ли пневмококки на простых питательных средах?

28. Какие колонии дают пневмококки на кровяном агаре?

29. Какие вещества вызывают и усиливают аутолиз колоний пневмококка?

30. Какие биохимические тесты используют для дифференциации зеленящего стрептококка от пневмококка?

31. Какие заболевания вызывают пневмококки?

32. Какое заболевание наиболее часто вызывают пневмококки?

33. Кто может быть источником пневмококковой инфекции?

34. Каковы пути передачи заразного начала при пневмококковых инфекциях?

35. Какие антибиотики применяются для лечения стрептококковых инфекций?

36. Проведение каких мероприятий предусматривает профилактика стрептококковых инфекций?

Таксономия - наука о принципах и методах распределения (классификации) организмов в иерархическом плане.

Выделяют высшие таксоны – Царство, Отдел, Класс, Порядок, Семейство, Триба, Род, Вид. Основной таксономической единицей в биологии является вид (species).

Вид – это эволюционно сложившаяся совокупность микроорганизмов, имеющих единое происхождение, сходный генотип и максимально близкие фенотипические признаки и свойства .

Принципы систематики:

q Филогенетический (для крупных таксонов).

q Фенотипический. В нем используются:

§ Тинкториальные свойства - способность окрашиваться различными красителями.

§ Культуральные свойства - особенности роста бактерий на жидких и плотных питательных средах.

§ Подвижность

§ Спорообразование - форма и характер расположения споры в клетке.

§ Физиологические свойства - тип питания; тип дыхания.

§ Биохимические свойства - способность ферментировать различные субстраты.

§ Антигенные свойства.

q Генотипический. В ее основе лежит изучение нуклеотидного состава ДНК и наиболее важных характеристик генома, в частности, его размера (величина, объем, молекулярная масса) и других параметров. Наиболее точным методом установления генетического (геномного) родства между бактериями является определение степени гомологии ДНК. Чем больше идентичных генов, тем выше степень гомологии ДНК и ближе генетическое родство.

q Смешанный. В основе лежит принцип сопоставления организмов по возможно большему количеству учитываемых признаков при допущении, что все они для систематики равноценны.

Изменчивость микроорганизмов приводит к тому, что некоторые признаки в пределах одного и того же вида могут варьировать. Отсюда сложилось понятие о вариантах (варах, типах), или инфраподвидовых категориях, микроорганизмов, которые отличаются отдельными признаками от стандартных видов. Так, различают: морфологические (морфовары ), биологические (биовары ), ферментативные (ферментовары или хемовары ), различные по резистентности к антибиотикам и бактериофагам (резистенсвары и фаговары ), различные по антигенной структуре (серовары ) и патогенности для хозяев (патовары ) варианты бактерий.

Идентификация - установление их таксономического положения микроорганизмов и, прежде всего их видовой принадлежности. Определение видовой принадлежности является решающим моментом бактериологической диагностики инфекционных заболеваний. Чаще всего для идентификации патогенных бактерий изучают их морфологические, тинкториальные, культуральные, биохимические и антигенные свойства.

Штаммом называют культуру, выделенную из определенного источника, или из одного и того же источника в разное время. Штаммы обозначают либо протокольными номерами, либо по источнику выделения (человек, животное, внешняя среда), либо по местности (городу), где он был выделен. Штамм - более узкое понятие, чем вид.

Клоном называют культуру микроорганизма, выделенную из одной клетки (одноклеточная культура).

Чистая культура представляет собой микробные особи одного и того же вида, выращенные из изолированной колонии, выращенной на твердой питательной среде.

Согласно бинарной (биноминальной) номенклатуре каждый микроорганизм имеет название, состоящее из двух слов: первое слово означает род и пишется с прописной буквы, второе слово означает вид и пишется со строчной буквы.

Например, Escherichia coli .

ПНЕВМОККОКИ

Firmicutes, Streptococcaceae, Streptococcus Относится к группе пиогенных кокков , так как вызывают гнойно-воспалительные процессы различной локализации . Представляет собой условно-патогенную микрофлору верхних дыхательных путей (носоглотки) .

S . pneumoniae представляет собой ланцетовидной формы диплококки, заключённые в полисахаридную капсулу (в мазках из патматериала). Имеет тропизм к легочной ткани , что обусловлено наличием специальных адгезинов.

Капсула имеет диагностическое значение . По полисахаридному капсульному антигену различают 84 серотипа (типоспецифический антиген). Данный антиген является протективным. В схему Ленсфильд S . pneumoniae не входит.

Мембраноповреждающий токсин – пневмолизин (аналог О-стрептолизина) (осмотический лизис эритроцитов). Разрушает реснички мерцательного эпителия. ?М-белок и полисахаридная капсула обеспечивают устойчивость к фагоцитозу и адгезию. Капсула является главным фактором патогенности. Бескапсульные пневмококки авирулентны. Капсула обладает токсичностью и активирует комплемент. ?Субстанция С – тейхоевая кислота клеточной стенки, содержащая холин и взаимодействующая с С-реактивным белком , стимулируя воспалительные реакции. Различные ферменты – гиалуронидаза, пептидаза секреторного Ig A и другие.

Капнофилы (5-10% СО 2), факультативные анаэробы, мезофилы, требовательны к питательным средам (хорошо растут на кровяном агаре, сердечно-мозговых средах, эритрит агаре). На кровяном агаре – мелкие блестящие колонии с частичным гемолизом.

1. Каталазотрицательны (тест на семейство); 2. Гемолитически активны (?-гемолиз) . 3. Основные видовые тесты: ферментация инулина, лизис на средах с 10% желчью, чувствительность к оптохину.

Материал для исследования зависит от формы пневмококковой инфекции (мокрота, кровь, гной, фарингеальные мазки на выявление носительства). 1. Экспресс-методы (обнаружение возбудителя в патматериале): Микроскопическое исследование (по Граму и по Бурри-Гинсу ); Реакция «набухания капсулы» при обработке поливалентной противокапсульной сывороткой. Обнаружение антигена в патматериале (РСК, РИФ). 2. Бактериологический метод (культивируют в эксикаторе со свечой). 3. Серологический метод (определяют противокапсульные антитела). 4. Биологическая проба (внутрибрюшинное заражение белых мышей мокротой).

В норме - персистенция в верхних дыхательных путях . При ослаблении иммунитета попадают в нижние дыхательные пути, и возникает эндогенная инфекция . Возможно воздушно-капельное заражение восприимчивых людей – экзогенная инфекция . Инфицирование дыхательных путей чаще происходит при нарушении их целостности при вирусных инфекциях (бактериальные пневмонии как вторичные инфекции на фоне ОРВИ). Заболевания пневмококковой этиологии – пневмония, менингит, отит, конъюнктивит, сепсис и др.

Источник инфекции – больные и бактерионосители . Входные ворота – слизистые оболочки . Механизм передачи – контактный, аэрогенный .

Вакцины, приготовленные из высокоочищенных капсульных полисахаридов наиболее патогенных серотипов. Иммунитет – типоспецифический. При исследовании неконтаминированных материалов (кровь, плевральная жидкость) этиологический диагноз может быть установлен на основании факта выявления самого возбудителя и его антигенов. При исследовании контаминированных материалов (мокрота) необходимо принимать во внимание, что выделенный пневмококк может быть комменсалом верхних дыхательных путей и то, что пневмония – это полиэтиологичное заболевание . Точный диагноз может быть установлен при использовании комплекса методов с учётом критериев: выделение П. в диагностической концентрации (10 5 /мл) из мокроты, сероконверсия в парных сыворотках больного, изоляция П. из крови или плевральной жидкости.

ОРТОМИКСОВИРУСЫ

Семейство Orthomyxoviridae Роды Influenzavirus A , B и Influenzavirus C , различающиеся между собой по нуклеопротеидным антигенам : n вирус типа А n вирус типа В n вирус типа С ?Вирус типа С выделен в отдельный род, так как 7 фрагментов РНК , нет нейраминидазы, нет антигенной изменчивости (дрейфа и шифта) , для адсорбции на клетке используется другой тип рецепторов Жизненный цикл начинается в цитоплазме, геном синтезируется в ядре.

Вирион имеет сферическую форму , диаметр 80-120 нм, вирус сложный (суперкапсид ), тип симметрии - спиральный . Генома состоит из 8 фрагментов РНК и 4 капсидных белков : 1. Нуклеопротеид (NP), типоспецифичен, выполняет структурную и регуляторную роль 2. Транскриптаза (РНК-полимераза) 3. Эндонуклеаза 4. Репликаза Суперкапсид имеет два гликопротеина , которые входят в состав поверхностных шипов: 1. Гемагглютинин 2. Нейраминидаза Основные функции гемагглютинина вируса гриппа: 1) распознавание чувствительных клеток (клетки верхнего ДТ, покрытые сиаловой кислотой); 2) слияние с мембраной клетки, 3) пандемичность вируса (смена гемагглютинина - причина пандемий, его изменчивость – причина эпидемий гриппа); 4) формирование иммунитета . У вирусов гриппа А человека, млекопитающих и птиц обнаружено 13 антигенных типов гемагглютинина (H1-Н13 ). Функции нейраминидазы: 1) диссеминация вирионов ; 2) пандемические и эпидемические свойства вируса. У вируса гриппа А обнаружено 10 различных вариантов нейраминидазы (N1-N10 ) Таким образом, характерной особенностью вирусов гриппа типа А является высокая изменчивость антигенов Н и N. Из всех типов в состав вируса гриппа человека типа А входят 3 Н и 2 N. В зависимости от их сочетания выделяют три подтипа Н1N1, Н2N2, Н3N2 . Изменчивость обусловлена двумя генетическими процессами . Дрейф – небольшие изменения гликопротеинов , не выводящие штамм вируса за пределы данного подтипа (благодаря точечным мутациям генов). Шифт (скачок) – определяет полную замену антигенов в результате чего появляется новый подтип вируса (замена генов в связи с рекомбинациями между вирусами человека, животных и птиц). Типы С – стабильный. Тип В – дрейф выражен слабее, шифта нет.

Вирус гриппа чувствителен к нагреванию (при 65°С погибает в течение 5-10 мин.), высушиванию, действию солнечных лучей, при комнатной температуре погибает за несколько часов, легко обезвреживается дезинфицирующими веществами

Вирус типа А вызывает грипп у человека, млекопитающих и птиц, а вирусы типа В и типа С - только у человека. Вирус типа А вызывает пандемии и эпидемии, вирус типа В – эпидемии и локальные вспышки, вирус типа С – только спорадические случаи Источник инфекции - только человек, больной или носитель . Путь заражения - воздушно-капельный . Инкубационный период очень короток – от нескольких часов до 2 дней. Основным регулятором эпидемий гриппа является иммунитет

Материалом для исследования служит: Отделяемое носоглотки (получают либо путем смыва, либо с помощью ватно-марлевых тампонов), мазки-отпечатки слизистой носовых ходов, кровь и секционный материал. 1. Экспресс-диагностика: Прямой РИФ или ИФА (обнаружить вирусный антиген в мазках-отпечатках или в смывах из носоглотки больных). 2. Вирусологический: Заражение 10-11-дневных куриных эмбрионов (лучше в амниотическую полость). Вирус обнаруживают (индикация) в содержимом амниотической полости с помощью РГА , используют эритроциты кур, морских свинок и 0-группы крови. Идентифицируют вирус с помощью РТГА , применяя специфические сыворотки. 3. Серологический метод: Специфические антитела и возрастание их титра в 4 раза минимум (в парных сыворотках) выявляют с помощью РТГА, РСК, ИФА. Вирус гриппа типа B можно культивировать в культурах тканей.

1) живая из аттенуированного вируса 2) убитая цельновирионная 3) субвирионная вакцина (из расщепленных вирионов) 4) субъединичная вакцина, содержащая только гемагглютинин и нейраминидазу. Детей от 6 мес. до 12 лет, по рекомендации ВОЗ, следует прививать только субъединичной вакциной как наименее реактогенной и токсичной («Гриппол»).

ЧАСТНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

Методы изучения нормальной микрофлоры

Для изучения нормальной микрофлоры применяют два метода; бактериоскопический и бактериологический.

Бактериоскопический метод. Имеет большое самостоятельное значение для тех биотопов организма человека, в которых обитает большое количество различных видов микроорганизмов (полость рта. кишечник, вагина). Он позволяет получить общее представление о составе микрофлоры (преобладание грам/+ или грам/- бактерий той или иной формы - кокки, диплококки, стрептококки, палочки, бациллы, стрептобациллы, фузиформные бактерии, наличие грибов и т.д.), а также выявить те микроорганизмы, которые не удается культивировать на питательных средах. Бактериологический метод. Применяют для биотопов с широким спектром микроорганизмов (полость рта, кишечник, вагина), выполняют с учетом данных бактериоскопии.

Основные принципы бактериологического исследования:

а) использование качественной (видовой состав) и количественной

(количественное соотношение разных видов) оценки микрофлоры; 6) первичный посев материала без предварительного обогащения, так как

обогащение нарушает количественные соотношения видов; в) использование большого набора различных питательных сред, подбор

условий культивирования (аэробные, анаэробные, атмосфера СО 2 и т.д.). Методы взятия материала для исследования:

1. Получение естественных экскретов {слюна, моча и т.д.).

2. Метод реплик; а) отпечатки на поверхности агаровой среды, б) отпечатки марлево-агаровыми пластинами.

3. Метод смывов увлажненным тампоном.

4. Аспирационный метод (из межзубных пространств, гингивальных карманов, из верхних и средних отделов дыхательных путей, аспирация на фильтры).

5. Введение зондов в кишечник.

6. Метод аппликаций - снятие микроорганизмов с помощью бумажных или тканевых пластинок определенной площади.

Пневмококк (Streptococcus pneumoniae) - грамположительный ланцетовидный диплококк, имеет полисахаридную капсулу. Культивируется на средах с белком при рН 7,6 (5% кровяной агар), образует мелкие (средние) уплощенные колонии с а-гемолизом. Лучше растет при насыщении воздуха СО. По типу К-антигена имеет 84 варианта. Чувствителен к химическим и физическим факторам, в частности, к солям желчи (лизис), оптохину, NaCI. К факторам патогенности пневмококка относят капсулу, гиалуронидазу, нейраминидазу, экзопротеазу IgA, О-пневмолизин, лейкоцидин. Патогенен для белых мышей. Пневмококк вызывает острые и хронические заболевания дыхательного тракта (гайморит, бронхит, пневмония), менингит, сепсис, гнойно-воспалительные заболевания, ползучую язву роговицы. Материал для диагностического исследования берут в зависимости от формы пневмококковой инфекции: например, при пневмонии- мокроту, при сепсисе -кровь, при гнойном заболевании-гной, при отите - отделяемое из слухового прохода и т.д. Материал важно забрать до начала этиотропного лечения.

Для обнаружения антител исследуют сыворотку крови.

С целью лабораторной диагностики применяют следующие методы.

I. Экспресс-методы (обнаружение возбудителя в патологическом материале):

1. Микроскопическое исследование- мазок из патологического материала с окраской по Граму. Обнаружение грамположительных капсульных диплококков.

2. Определение антигена капсулы в реакции "Набухание капсулы" (по Нейфельду - феномен увеличения размеров капсулы в присутствии поливалентной противокапсульной сыворотки). Последняя наносится на мазок исследуемого материала; учет с помощью фазовоконтрастного микроскопа.

3. Обнаружение антигена в сыворотке или ликворе (РСК, латекс-агглютинация, встречный иммуноэлектрофорез). Экспресс-методы чаще являются ориентировочными, так как:

а) не всегда обнаружение пневмококка свидетельствует о его этиологической роли (часто носительство);

б) возбудитель не обнаруживается с началом этиотропного лечения.

II. Культуральный (бактериологический) метод:

1 этап. Материал (не позднее 1-2 часов с момента забора) засевают на 5% -и кровяной агар, культивируют в эксикаторе со свечой (СО2) 20-24 часа при температуре 37°С;

2 этап. Отбирают подозрительные колонии, дающие а-гемолиз, микроскопируют (окраска по Граму, на капсулу), отсевают в сывороточный бульон;

3 этап. Определяют чистоту культуры (окраска по Граму). Идентификацию проводят по морфологическим, серологическим (р. агглютинации на стекле с поливалентной противокапсульной сывороткой), культуральным, биологическим свойствам. Последние проводят путем посева в среду с оптохином (нет роста), в 10%-й желчный бульон (лизис), внутрибрюшинного заражения мышей (гибель). При необходимости (например, при пневмонии) доказывают этиологическую значимость пневмококка (в частности, определяют КОЕ/мл). Определяют также чувствительность к антибиотикам. Культуральный метод является ведущим методом диагностики, так как он ранний, точный, чувствительный и позволяет выбрать адекватное этиотропное лечение.

III. Серологический метод : определение противокапсульных антител и их динамики в сыворотке крови с помощью РНИФ (с ауто штамма ми), РСК и РИГА (с эталонными штаммами пневмококка). Чаще используют при хронических формах инфекции. Применение метода ограничивается более поздними сроками получения результата и отсутствием готовых диагностикумов.

IV. Биологический метод: внутрибрюшинное заражение белых мышей исследуемым материалом (чаще мокротой). Погибших мышей вскрывают, делают мазки-отпечатки, посевы крови и органов на кровяной агар с последующей идентификацией возбудителя. Метод вспомогательный, ограничивается трудоемкостью, наличием в материале других видов микроорганизмов, патогенных для мышей, низкой чувствительностью мышей к некоторым сероварам пневмококка.