ВИЧ – вирус, поражающий иммунную систему. В нашей иммунной системе существует большое количество клеток, выполняющих различные функции:

• Лейкоциты;
• Фагоциты;
• Макрофаги;
• Нейтрофилы;
• Т-хелперы (CD4-лимфоциты);
• Т-киллеры.

Каждая из этих клеток отвечает за определенный этап ответа на чужеродный объект. ВИЧ поражает только одну группу клеток – CD4 лимфоциты (Т-лимфоциты). Они отвечают за распознавание чужого гена.

По количеству тех или иных клеток врач делает выводы о состоянии пациента. Анализ на СПИД основан на количестве Т-лимфоцитов (CD4-лимфоцитов) в пробе крови.

Заболевания, при которых врач может назначить анализ на СПИД

Если анализ крови показывает неопределенные заболевания соединительной ткани, воспалительный процесс, может быть назначен анализ на ВИЧ. Хорошим маркером ВИЧ является резкое снижение CD4-лимфоцитов. В случае, когда выявлены другие инфекции и предрасположенность к определенной группе заболеваний (простудные, например), ВИЧ-тест не проводят.

Важно! При обнаружении процесса воспалительного характера, не имеющего основы необходимо сдать анализ на ВИЧ.

Не стоит пугаться, если врач начнет говорить об анализе на ВИЧ. Диагноз может не подтвердиться. При положительном результате важно как можно быстрее начать лечение.

Нормы

• Переутомление организма;
• Менструальный цикл;
• Эпидемиологическое окружение;
• Некоторые лекарства.

Количество Т-лимфоцитов (хелперов) восстанавливается после отдыха.

Если абсолютное количество CD4 не восстанавливается за определенные период, врач может назначить тест на ВИЧ.

Расшифровка результата анализа на СПИД

У здорового человека все показатели должны быть в норме. При изменении одного из параметров назначается тест на вирусную нагрузку. После проводится соотнесение результатов анализа крови с данным показателем. Это поможет вам установить причину нарушения.

Показатель лимфоцитов снижается в случае инфекционного заболевания, но восстанавливается после курса лечения до нормального уровня. Не произойдет улучшения показателей системы у больных ВИЧ. На этом основан тест.

Что такое иммунный статус

При определении иммунного статуса человека исследуются параметры крови:

• Общее и относительное число лимфоцитов;
• Количество помощников t-лимфоцитов;
• Фагоцитарная активность макрофагов;
• Изменение иммуноглобулинов разных классов.

Из всего перечисленного к ВИЧ специфичны только Т-лимфоциты.

Важно! О страшном заболевании свидетельствует снижение CD4-лимфоцитов. Повышение их уровня свидетельствует о другом воспалительном процессе.

О чем говорит количество CD4

CD4 клетки содержаться в крови в определенном количестве. Если происходит их снижение, организм быстро восстанавливает численность. При угнетении иммунной системы происходит снижение количества лимфоцитов, активность Т-супрессоров напротив приводит к активации защитных сил.

Вирусные клетки размножаются очень быстро, поэтому при заражении ВИЧ уровень Т-лимфоцитов не может восстановиться до нормального уровня.

Изменения в количестве CD4

CD4 клетки первые реагируют на проникновение в организм чужеродного агента. Снижение уровня свидетельствует о высокой активности вируса.

Количество клеток/мкл может изменяться в зависимости от:

• Время суток (утром он выше);
• Наличия инфекционных заболеваний;
• Процесса обработки крови (при неправильной процедуре клетки могут разрушиться);
• Принимаемых лекарственных препаратах (гормональные и стероидные препараты значительно влияют на этот показатель).

Процентное количество CD4

При проведении теста на ВИЧ показатели крови часто выражаются в процентах.

Хелперы CD3, D8, CD19, CD16+56, а также соотношение CD4 CD8 понижается при снижении иммунного статуса. Но эти параметры не свидетельствуют о ВИЧ.

К вирусу иммунодефицита специфичен только хелпер CD4:

• Если его содержание 12-15%, то в пересчете в крови содержится 200 клеток/мм 3 ;
• При значениях от 29% содержание клеток составляет от 450 кл/мм 3 ;

У ВИЧ-отрицательного человека значение данного параметра 40%.

При повреждении иммунных клеток происходит снижение иммунитета. для определения скорости этого процесса рассчитывают вирусную нагрузку – количество чужеродного РНК в мл крови. Этот параметр носит прогностический характер.

Иммунная система женщин более слабая, поэтому показатель вирусной нагрузки по результатам исследования начинает снижаться гораздо раньше, чем у мужчин.

Что означает неопределяемая вирусная нагрузка

Показатель вирусной нагрузки может не определиться через несколько месяцев. В зависимости от активности вируса, его численность к крови может меняться. Тогда, при низкой чувствительности аппарата он не обнаружит вирус.

Важно! Неопределенная вирусная нагрузка не значит, что вирус полностью исчез. Лечение от СПИДа нельзя прекращать, так как без лечения произойдет ремиссия и количество вируса возрастет.

Эффект вакцинаций и инфекций

Вакцинация или инфекционное заболевание временно повышает показатель вирусной нагрузки. Прием профилактических лекарств, наоборот, снижает. Для точного определения иммунного статуса после перечисленных процедур следует подождать некоторое время. Период установит врач в зависимости от обстоятельств.

Какие преимущества дает неопределяемая вирусная нагрузка

У ВИЧ-положительных людей неопределяемая вирусная нагрузка может возникнуть в случае:

• Правильной антиретровирусной терапии;
• Низкий уровень прогрессирования вируса.

Это способствует нормализации состояния больного. При многочисленных повторных курсах может развиться иммунологическая толерантность. Иммунологический ответ в этом случае перестает реагировать на лечение. В таком случае необходимо сменить курс лечения. Такое может произойти, если:

• Курс лечения не был окончен;
• Один и тот же курс повторялся несколько раз подряд;
• Индивидуальная нечувствительность к назначенным лекарствам.

Естественные вариации

Вирус может находиться в организме в нескольких стадиях:

• Инкубационная стадия;
• Период острой инфекции;
• Латентная стадия;
• Стадия вторичных заболеваний;

В разные периоды активности показатели вирусной нагрузки значительно изменяются. В течение нескольких дней этот параметр может измениться втрое в независимости от курса лечения. Резкие кратковременные скачки могут не влиять на состояние здоровья больного. Определение лекарственной резистентности проводится несколько раз. Окончательный результат высчитывается как среднее значение.

Принятие супрессоров ведет к стабилизации численности вирусов в крови.

Значимые изменения

Если численность вирусов ВИЧ остается высокой на протяжении нескольких месяцев, стоит обратить на это внимание. Важны показатели превышающие норму в 3 – 5 раз. Если повышение уровня CD4-лимфоцитов проходит на фоне курса лечения, возможно, следует сменить лекарства, так как организм утратил чувствительность к ним.

Минимизация отклонений

При сдаче анализа на количество вируса иммунодефицита, СД4-лимфоцитов в крови стоит понимать, что у разных аппаратов различная чувствительность. Она может отличаться в зависимости от марки прибора или значения калибровки. Для того чтобы минимизировать погрешность, связанную с приборами, анализ стоит сдавать в одной и той же клинике на одном и том же приборе.

Если в семье один из партнеров является ВИЧ-положительным, в половой жизни существует определенное расписание. Если повышается вирусная нагрузка, следует полностью воздержаться от полового контакта, так как значительно повышается вероятность заражения.

При снижении порога численности вирусов, применяя определенные лекарства по рекомендации врача, половую активность можно возобновить.

Каков порог определения нынешних тестов

Чувствительных современных тестов для диагностики ВИЧ постепенно возрастает. Большинство приборов в России чувствительны к численности вируса 400-500 штук/мл крови. Некоторые более дорогие приборы определяют вирус стандартным методом при численности 50 штук/мл.

В литературных данным указано, что некоторые современные модели способны распознать ВИЧ при численности всего 2 штуки/мл крови, но такие технологии в больницах и частных клиниках пока не применяются.

Ошибки

Несмотря на высокую чувствительность современных приборов, до сих пор происходят ошибки при определении значений вирусной нагрузки. Они связаны с:

• Неправильной калибровкой прибора;
• Плохой обработкой колб после предыдущих анализов;
• Неправильно подготовленный образец крови;
• Наличие в крови лекарственных препаратов, снижающих чувствительность.

Эти ошибки исправляются при повторном анализе того же образца крови или новой порции.

Решение о начале приема антиретровирусной терапии

Если тесты показывают высокое значение вирусной нагрузки на протяжении длительного периода времени, врач принимает решение о назначении курса лечения. Начало лечения ВИЧ инфекции и прием лекарственных препаратов начинается не сразу, а постепенно. Большинство препаратов вводятся в курс лечения на протяжении определенного периода, чтобы организм привык к значительному количеству химических агрессивных компонентов. В принятии такого решения важную роль играет количество CD4-лимфоцитов в крови.

В случае, если человек не могут или не хочет начинать лечение, он должен постоянно сдавать анализ и контролировать уровень лимфоцитов в крови.

Совет! Если Вы не начали курс антиретровирусной терапии, постоянно сдавайте анализ на ВИЧ и количество CD4 в крови. Если пропустить критический минимум, организм может не справиться. Восстановление займет гораздо больше времени, средств и сил.

Если у вас увеличилась вирусная нагрузка во время приема терапии

Если показатель вирусной нагрузки продолжает увеличиваться после начала лечения, может быть два варианта:

• Прошло недостаточно время лечения для восстановления нормальных показателей;
• Организм не чувствителен к назначенным лекарствам.

Решение о дальнейших действиях принимает врач на основании анализов и состояния больного.

Как улучшить результаты анализа на вирусную нагрузку

В результате правильного лечения количество cd4 в крови должно постепенно восстанавливаться.

Способствовать этому будет также:

• Правильное питание;
• Отказ от вредных привычек;
• Отсутствие стрессов;
• Отсутствие переутомления.

Если вы не принимаете антиретровирусную терапию

Решая, начинать курс лечения или нет, важно понимать, что такое антиретровирусная терапия при ВИЧ СПИД. Эти лекарства направлены на подавление деятельности вируса за пределами клеток организма. За счет этого во время терапии происходит восстановление иммунной системы у больных.

В комплексе препаратов есть, также, те, которые способствуют восстановлению естественных защитных сил организма.

В отсутствии такой терапии вирус имеет возможность беспрепятственно размножаться, поражая все больше клеток иммунной системы носителя.

Наконец-то у меня на руках все результаты анализов на иммунный статус и пищевую аллергию. Если вы не смотрели первую часть статьи – просьба ознакомиться, во избежание возникновения лишних вопросов.

Признаться честно, увидев результаты, я сначала сильно огорчился, потом обрадовался, потом снова огорчился, но уже не так сильно как в первый раз:D Итак, приступим.

Не будем тянуть сами знаете кого за сами знаете что. Красным выделены показатели, результаты по которым превышают норму, зеленым – результаты ниже нормы.

Исследование	Значение	Норма
0-лимфоциты, %	10,9	16 – 24
0-лимфоциты, х10*9/л	0,119	0,3 – 0,5
B1 лимфоциты CD19+5+, %	0,8	0,5 – 2,1
B1 лимфоциты CD19+5+, % от CD19+	35,242	4,1 – 17,5
B1 лимфоциты CD19+5+, х10*9/л	0,009	0,022 – 0,115
B2 лимфоциты CD19+5-, %	1,47	6,5 – 14,9
B2 лимфоциты CD19+5-, % от CD19+	64,758	82,1 – 96,3
B2 лимфоциты CD19+5-, х10*9/л	0,016	0,081 – 0,323
CD16+ CD56+ (NK-клетки), %	2,46	5 – 20
CD16+ CD56+ (NK-клетки), х10*9/л	0,027	0,2 – 0,4
CD16+ CD56- (NK-клетки), %	3,79	1,1 – 2,9
CD16- CD56+ (NK-клетки), %	3,13	2,7 – 5
CD19+ (В-лимфоциты), %	2,4	8 – 19
CD19+ (В-лимфоциты), х10*9/л	0,026	0,19 – 0,38
CD3+ (Т-лимфоциты), %	86,7	58 – 76
CD3+ (Т-лимфоциты), х10*9/л	0,949	1,1 – 1,7
CD3+CD25+(активированные T-лимфоциты), %	5,45	до 6
CD3+HLA-DR+, %	5,31	2 – 12
CD3+HLA-DR+, x10*9/л	0,058	0,03 – 0,2
CD4+ (Т-хелперы), %	47,3	36 – 55
CD4+ (Т-хелперы), х10*9/л	0,518	0,4 – 1,1
CD4+ / CD8+	1,429	1,5 – 2,5
CD4+25+127- bright (T-reg), % от CD4+	1,16	1,65 – 5,75
CD4+25+127- bright (T-reg), х10*9/л	0,006	0,009 – 0,078
CD8+ (Т-супресс./цитотокс.), %	33,1	17 – 37
CD8+ (Т-супресс./цитотокс.), х10*9/л	0,362	0,3 – 0,7
КАФ (количество активных фагоцитов)	2,692	1,6 – 5
Фагоцитарная емкость крови	24,228	12,5 – 25
Фагоцитарное число	7,2	5 – 10
Фагоцитарный показатель, %	80	65 – 95

Я не зря выделил показатель CD4+ / CD8+ . Что это такое, с чем его едят и почему он так важен – об этом ниже.

Чем характеризуется неспецифический язвенный колит? С точки зрения иммунной природы заболевания, НЯК возникает из-за чрезмерного объема антител против своих собственных клеток, принимая их за чужеродные. Далее по тексту будет много определений, я постараюсь представить их в более удобоваримой и понятной форме.

CD4 характерен для хелперных Т-клеток, представлен также на моноцитах, макрофагах, дендритных клетках. Т-хелперы – это индукторы иммунного ответа. Они регулируют силу ответа на враждебный антиген и контролируют антигенную саморегуляцию.

Причины повышения уровня CD4:

• Аутоиммунные заболевания.
• Цирроз печени, гепатиты.
• Болезнь Вальденстрема.
• Тиреоидит Хашимото.

Причины снижение уровня CD4:

• Врожденные иммунодефициты.
• Злокачественные опухоли.
• Ионизирующее излучение.
• Лечение цитостатиками, иммунодепрессантами.
• Недостаточность питания.

Отсеиваем лишнее и получаем возможную причину снижение уровня CD4: цитостатики ( , ).

CD8 характерен для супрессорных и/или цитотоксических Т-клеток, большей части тимоцитов. Задача Т-лимфоцитов-супрессоров – угнетение иммунного ответа организма. Они тормозят выработку антител различных классов вследствие задержки проли­ферации и дифференцировки В-лимфоцитов, а также развитие гиперчувс­твительности замедленного типа. При нормальном иммунном ответе на попадание в организм чужеродного антигена максимальная активация Т-супрессоров отмечается спустя 3-4 недели.

Причины повышения уровня CD8:

• Инфекции с хроническим и затяжным течением.
• Туберкулез, лепра, ВИЧ-инфекция.
• Тяжелые ожоги, обширные травмы.
• Ионизирующее излучение.
• Недостаточность питания.

Причины снижения уровня CD8:

• Врожденные иммунодефициты.
• Аутоиммунные заболевания.
• Цирроз печени, гепатиты.
• Тромбоцитопения, приобретенная гемо­литическая анемия.
• Болезнь Вальденстрема.
• Тиреоидит Хашимото.
• Активация антитрансплантационного иммунитета.

У меня CD8 в норме.

Ведущее значение в оценке состояния иммунной системы имеет соот­ношение Т-хелперов (CD4) и Т-супрессоров (CD8) в крови, так как от этого зависит интенсивность иммунного ответа. С нижение функции Т-супрессоров ведет к преобладанию стимулирующего влияния Т-хелперов, в том числе и на те В-лимфоциты, которые продуцируют аутоантитела (те самые избыточные). При этом их количество может достигнуть критического уровня, что спо­собно вызвать повреждение собственных тканей организма.

О-лимфоциты (нулевые лимфоциты) – это лимфоциты, отличающиеся по своим поверхностным свойствам как от В-лимфоцитов, так и от Т-лимфоцитов. Часть этих клеток несут на своей поверхности рецепторы для , уничтожая любые клетки, на поверхности которых присутствует данного класса. К О-лимфоцитам относятся также естественные клетки-киллеры, действующие независимо от наличия антител.

Главные функции О-лимфоцитов:

1. Обеспечение противоопухолевого иммунитета.
2. Обеспечение противоинфекционного иммунитета.

О чем говорит снижение показателей? Правильно, о слабой защите от вышеупомянутых проблем с онкологией и инфекциями. Предполагаю, что причиной является Ремикейд, последняя капельница которого была мне установлена в ноябре 2015 года.

Следующие по списку – B-лимфоциты, а точнее группа CD19.

CD19 присутствует на B-клетках, их предшественниках, фолликулярных дендритных клетках и считается самым ранним маркером B-клеточной дифференциации. Регулирует развитие, дифференциацию и активацию B-лимфоцитов.

Причины снижения CD19:

• Новообразования иммунной системы.
• Лечение цитостатиками и иммунодепрессантами.
• Спленэктомия.
• Ионизирующее излучение.
• Недостаточность гуморального .

Что мы видим: из всех показателей CD19 (“B1 лимфоциты CD19+5+, %”, “B1 лимфоциты CD19+5+, % от CD19+”, “B1 лимфоциты CD19+5+, х10*9/л”, “B2 лимфоциты CD19+5-, %”, “B2 лимфоциты CD19+5-, % от CD19+”, “B2 лимфоциты CD19+5-, х10*9/л”, “CD19+ (В-лимфоциты), %” и “CD19+ (В-лимфоциты), х10*9/л”) у меня завышен, притом почти в два раза, только второй (“B1 лимфоциты CD19+5+, % от CD19+”). Да, это может косвенно подтверждать наличие у меня НЯК. Насчет показателей ниже нормы – опять же, привет Азатиоприну и Ремикейду.

CD3 – поверхностный маркер, специфичный для всех клеток субпопуляции Т-лимфоцитов. Зрелые Т-лимфоциты отвечают за реакции клеточного иммунитета и осуществляют иммунологический надзор за антигенной саморегуляцией в организме. Т-лимфоциты выполняют в организме две важные функции: эффекторную и регуляторную.

Эффекторная функция Т-лимфоцитов – специфическая цитотоксичность по отношению к чужерод­ным клеткам. Регуляторная функция (система Т-хелперы/Т-супрессоры) – контроль за интенсивностью развития специфической реакции иммунной системы на чужеродные антигены.

Причины повышения уровня CD3:

• Гиперактивность иммунитета.
• Острый и хронический лимфолейкоз.
• Синдром Сезари.

Причины снижения уровня CD3:

• Врожденные иммунодефициты.
• Инфекции с хроническим и затяжным течением.
• Туберкулез, лепра, ВИЧ-инфекция.
• Т-клеточная лимфома, волосатоклеточный лейкоз.
• Тяжелые ожоги, обширные травмы.
• Ионизирующее излучение.
• Лечение , иммунодепрессантами.
• Недостаточность .

Из пяти позиций с CD3 у меня один показатель завышен, один занижен, и другие в норме. О чем может говорить повышение “CD3+ (Т-лимфоциты), %”? В результате несложного отсеивания остается гиперактивный иммунитет.

Гиперактивность или гиперчувствительность иммунной системы – это нежелательная повышенная реакция иммунитета к какому-либо веществу. Иммунная система агрессивно и неадекватно реагирует на вполне безобидные вещества.

Метод определения Иммунофенотипирование (проточная цитофлюориметрия, безотмывочная технология)

Исследуемый материал Цельная кровь (с ЭДТА)

Доступен выезд на дом

В профиль входят следующие показатели:

• Лимфоциты, абсолютное значение,
• Т-лимфоциты (CD3+),
• Т-хелперы (CD3+CD4+),
• Т-цитотоксические лимфоциты (CD3+CD8+),
• Иммунорегуляторный индекс (CD3+CD4+/CD3+CD8+),
• В-лимфоциты (СD19+),
• ЕК-клетки (CD3-CD16+CD56+),
• Т-ЕК-клетки (CD3+CD16+CD56+).

Лимфоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития. Физиологическая роль их может быть различной. Эти структуры являются мишенями при иммунофенотипировании лимфоцитов как антигенные маркёры различных субпопуляций, присутствие которых определяют с помощью меченых моноклональных антител. Поверхностные антигенные структуры на клетках, выявляемые моноклональными антителами, назвали кластерами дифференциации (CD, clusters of differentiation). Кластерам дифференциации в целях стандартизации присвоены определённые номера. Используя флюорохром-меченые моноклональные антитела, связывающиеся с определёнными CD, можно произвести подсчёт содержания лимфоцитов, относящихся к различным по функции или стадии развития субпопуляциям. Это позволяет понять природу некоторых заболеваний, оценить состояние пациента, следить за течением и прогнозировать дальнейшее развитие заболевания.

Основные субпопуляции лимфоцитов

Т-лимфоциты - лимфоциты, созревание которых происходит в тимусе (отсюда их название). Они участвуют в обеспечении клеточного иммунного ответа и контролируют работу В-лимфоцитов, ответственных за образование антител, т. е. за гуморальный иммунный ответ.

Т-хелперы (от англ. «to help» – помогать) – разновидность Т-лимфоцитов, несут на своей поверхности структуры, способствующие распознаванию антигенов, презентированных вспомогательными клетками, участвуют в регуляции иммунного ответа, вырабатывая различные цитокины.

Цитотоксические Т-клетки - распознают фрагменты антигена на поверхности клеток-мишеней, ориентируют свои гранулы по направлению к мишени и высвобождают их содержимое в области контакта с ней. При этом некоторые цитокины являются сигналом гибели (по типу апоптоза) для клеток-мишеней.

В-лимфоциты (от лат. «bursa» - сумка, по названию сумки Фабрициуса, в которой созревают эти лимфоциты у птиц) - проходят развитие в лимфоузлах и других периферических органах лимфоидной системы. На поверхности эти клетки несут иммуноглобулины, функционирующие как рецепторы к антигенам. В ответ на взаимодействие с антигеном В-лимфоциты отвечают делением и дифференциацией в плазматические клетки, вырабатывающие антитела, посредством которых обеспечивается гуморальный иммунитет.

ЕК-клетки (естественные киллерные клетки, или натуральные киллеры) – клетки с естественной, неиммунной цитотоксической активностью к неопластически изменённым клеткам-мишеням. ЕК-клетки не относятся ни к зрелым Т- или В-лимфоцитам, ни к моноцитам.

Т-ЕК (ЕКТ)-клетки – это клетки с естественной неиммунной киллерной активностью, имеющие признаки Т-лимфоцитов.

Кластеры дифференциации антигенов

CD3 – поверхностный маркёр, специфичный для всех клеток субпопуляции Т-лимфоцитов. По функциям относится к семейству белков, формирующих комплекс мембранной передачи сигнала, связанный с Т-клеточным рецептором.

CD4 – характерен для хелперных Т-клеток; представлен также на моноцитах, макрофагах, дендритных клетках. Он связывается с молекулами MHC класса II, экспрессированными на антигенпрезентирующих клетках, облегчая распознавание пептидных антигенов.

CD8 – характерен для супрессорных и/или цитотоксических Т-клеток, ЕК-клеток, большей части тимоцитов. Это рецептор Т-клеточной активации, который облегчает распознавание клеточно-связанных антигенов MHC класса I (major histocompatibility complex - главный комплекс гистосовместимости).

CD16 – используется вместе с CD56 преимущественно для идентификации ЕК-клеток. Представлен также на макрофагах, тучных клетках, нейтрофилах, некоторых Т-клетках. Это компонент рецепторов, связанных с IgG, опосредующих фагоцитоз, продукцию цитокинов и антителозависимую клеточную цитотоксичность.

CD19 – присутствует на B-клетках, их предшественниках, фолликулярных дендритных клетках, считается самым ранним маркёром B-клеточной дифференциации. Регулирует развитие, дифференциацию и активацию B-клеток.

CD56 – прототипный маркёр ЕК-клеток. Помимо ЕК-клеток присутствует на эмбриональных, мышечных, нервных, эпителиальных клетках, некоторых активированных Т-клетках. CD56-позитивны такие гематологические опухоли, как ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, анапластическая крупноклеточная лимфома, плазмоклеточная миелома (плазмоклеточная лейкемия CD56-негативна). Это молекулы адгезии клеточной поверхности, которые облегчают гомофильную адгезию и участвуют в контактном ингибировании роста, ЕК-клеточной цитотоксичности, развитии нервных клеток.

Литература

1. Зурочка А.В., Хайдуков С.В. и др. - Проточная цитометрия в медицине и биологии. - Екатеринбург: РИО УрО РАН, 2013. – 552 с.
2. Клиническая иммунология и аллергология / Ред. Лолор-младший Г., Фишер Т, Д. Адельман Д../: Пер. с англ. - М.: Практика, 2000. - 806 с.
3. Клиническая лабораторная диагностика. Национальное руководство. Том 2./Ред. Долгов В.В., Меньшиков В.В./ – М., ГЭОТАР-Медиа, 2012 – 808 с.
4. Практическое руководство по детским болезням. Том 8 Иммунология детского возраста. /Ред. А.Ю.Щербина, Е.Д.Пашанов/ - Москва: МЕДПРАКТИКА, 2006 - 432 с.
5. Ройт А., Бростофф Д., Дейл Д. Иммунология. - М.: Мир, 2000 — 592 с
6. Ярилин А. А. Иммунология. – М.: ГЭОТАР-Медиа. 2010 - 752 с.
7. Leach М., Drummond М., Doig A. Practical Flow Cytometry in Haematology Diagnosis Hardcover. – WILEY-BLACKWELL, 2013.
8. Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B. – USA: W.B Sounders Company, 2006 - 1798 p.

Активационные маркеры – CD25, НLA-DR. появляются на Т-лимфоцитах, находящихся в стадии активации и могут быть использованы для диагностики, оценки активности иммунопатологических заболеваний, мониторинга лечения.

Уровень CD3 + CD25 + , CD3 + НLA-DR + повышен – активация иммунного ответа: острый или хронический воспалительный процесс, пневмония, ВИЧ-инфекция, аутоиммунные и онкологические заболевания. Показатели снижаются до нормы при благоприятном течении заболевания.

Уровень CD3 + CD25 + , CD3 + НLA-DR + снижен – иммунодефициты с нарушением Т-клеточного звена иммунитета.

Т-хелперы (CD3CD4)

Уровень CD3 + CD4 + повышен – острый инфекционно-воспалительный процесс, обострение аллергических и аутоиммунных заболеваний.

Уровень CD3 + CD4 + снижен – врожденные и приобретенные иммунодефициты, ВИЧ-инфекция, инфекционный мононуклеоз, злокачественные новообразования, длительное лечение цитостатиками, гормонами, иммунодепрессантами.

Т-цитотоксические (Т-киллеры) (CD3CD8)

Уровень CD3 + CD8 + снижен – первичные и вторичные иммунодефициты, прогрессирующие злокачественные новообразования, лучевая терапия, длительное лечение цитостатиками, гомонами, иммунодепрессантами.

Иммунорегуляторный индекс

При некоторых заболеваниях диагностическое и прогностическое значение имеет соотношение CD4/CD8 или иммунологический индекс (ИРИ). Норма : 1,2-2,5.

CD4/CD8 (ИРИ) повышен – аутоиммунные заболевания, острый Т-лимфобластный лейкоз, тимома.

CD4/CD8 (ИРИ) снижен – вирусные инфекции (герпес, корь вирусный гепатит, инфекционный мононуклеоз, ВИЧ/СПИД), хронические заболевания, опухоли, множественная миелома. Величина ИРИ менее 1 косвенно соответствует иммунодефициту.

Натуральные киллеры (НK-клетки, CD16CD56)

НK-клетки – большие гранулярные лимфоциты, лизирующие клетки - мишени, инфицированные вирусами, внутриклеточными возбудителями, а также мутантные и опухолевые клетки, без специфического распознавания, необходимого для Т-киллеров.

Уровень НK-клеток (CD3 +- CD16 + CD56 +) повышен – острый воспалительный процесс, бронхиальная астма, злокачественные новообразования, лейкоз.

НКТ-клетки (CD3CD16CD56)

НKТ-клетки имеют рецепторы, как НK-клеток, так и Т-лимфоцитов. Осуществляют регуляторную функцию, синтезируя цитокины.

Уровень (CD3 + CD16 + CD56 +) повышен – при острых тяжелых воспалительных процессах, онкологических заболеваниях.

Уровень (CD3 + CD16 + CD56 +) снижен – при аутоиммунных заболеваниях.

В-лимфоциты (CD19,CD20)

Уровень СD19 + ,CD20 + снижен – гипо- и агаммаглобулинемии (врожденные и приобретенные); лимфолейкозы, лимфомы не В-клеточного типа; спленэктомия; прием иммунодепрессантов.

Иммунодиагностика нарушений синтеза иммуноглобулинов

Определение содержания иммуноглобулинов важно при диагностике и клиническом мониторинге врожденных иммунодефицитов, моноклональных гаммапатий, инфекций и аутоиммунных заболеваний. Методы определения иммуноглобулинов: радиальная иммунодиффузия по Манчини, нефелометрия. Уровень IgE определяют методом ИФА.

Иммуноглобулин М (IgM) - белок глобулиновой природы, молекулярной массой 900 кДА, синтезируемый В-лимфоцитами преимущественно при первичном контакте с антигеном.

Иммуноглобулин М образуется через 3-6 дней после взаимодействия с антигеном и осуществляет основную защиту организма при бактериемии. Не проникает через сосудистую стенку, плацентарный барьер.

Уровень IgM снижен – первичные иммунодефициты с нарушением гуморального звена,гастроэнтеропатии с потерей белка, ожоговая болезнь, множественная миелома IgG или IgA-типа, спленэктомия, иммуносупрессивная терапия.

Иммуноглобулин G (IgG) – белок глобулиновой природы молекулярной массой 150 кДА, синтезируемый В-лимфоцитами в ответ на антигенный стимул. При первичном инфицировании появляется через 8-14 дней и осуществляет защиту организма от возбудителей и их токсинов.IgG проникает через сосудистую стенку и плаценту.

Уровень IgG повышен – затяжные, хронические и рецидивирующие инфекции, аутоиммунные заболевания (ревматоидный артрит, СКВ, болезнь Шегрена), болезни печени (гепатиты, циррозы), злокачественные новообразования, множественная миелома IgG-типа, доброкачественная парапротеинемия.

Уровень IgG снижен – первичные иммунодефициты с нарушением гуморального звена, гастроэнтеропатии с потерей белка, ожоговая болезнь, нефротический синдром, множественная миелома IgA или IgM-типа, спленэктомия, иммуносупрессивная терапия.

Иммуноглобулин А (IgA) - белок сыворотки крови и секретов слизистых оболочек с молекулярной массой 160 кДА, синтезируемый В-лимфоцитами в ответ на антигенное воздействие. Появляется через 15-21 день после контакта с антигеном, преобладает в выделениях слизистых (слюна, слезная жидкость, носовой секрет, пот, бронхиальный секрет), где обеспечивает защиту от возбудителей, пыльцевых и пищевых аллергенов.

Уровень IgA повышен – хронические инфекции органов пищеварения и дыхательных путей, опухоли нижних отделов ЖКТ, аутоиммунные заболевания (на ранней стадии), множественная миелома IgA-типа, болезни печени (гепатит, цирроз), остеосаркома, миеломная болезнь, муковисцидоз.

Уровень IgA снижен – врожденные дефициты с нарушением гуморального звена, хронические и рецидивирующие заболевания респираторного тракта, гастроэнтеропатии с потерей белка, ожоговая болезнь, нефротический синдром, множественная миелома IgG и IgM-типа, спленэктомия, иммуносупрессивная терапия.

Иммуноглобулин Е (IgE) – белок сыворотки крови и секретов слизистых оболочек с молекулярной массой 200 кДА. Синтезируется В-лимфоцитами в ответ на антигены внешней среды (домашняя пыль, пыльца растений, инфекционные агенты, пищевые продукты и т.д.) и вызывают аллергические реакции немедленного типа.

Первым исследованием всегда является подсчет лейкоцитарной формулы (см. главу «Гематологические исследования»). Оцениваются как относительные, так и абсолютные значения количества клеток периферической крови.

Определение основных популяций (Т-клетки, В-клетки, натуральные киллеры) и субпопуляций Т-лимфоцитов (Т-хелперы, Т-ЦТЛ). Для первичного исследования иммунного статуса и выявления выраженных нарушений иммунной системы ВОЗ рекомендовано определение CD3, CD4, CD8, CD19, CD16+56, соотношение CD4/CD8. Исследование позволяет определить относительное и абсолютное количество основных популяций лимфоцитов: Т-клетки – CD3, В-клетки – CD19, натуральные киллеры (NK) – CD3- CD16++56+, субпопуляции Т лимфоцитов (Т-хелперы CD3+ CD4+, Т-цитотоксические CD3+ CD8+ и их соотношение).

Метод исследования

Иммунофенотипирование лимфоцитов проводится c использованием моноклональных антител к поверхностным дифференцировочным ангинам на клетках иммунной системы, методом проточной лазерной цитофлуорометрии на проточных цитофлуориметрах.

Выбор зоны анализа лимфоцитов производится по дополнительному маркеру CD45, который представлен на поверхности всех лейкоцитов.

Условия взятия и хранения образцов

Венозная кровь, взятая из локтевой вены, утром, строго натощак, в вакуумную систему до указанной на пробирке метки. В качестве антикоагулянта используется К2ЭДТА. После взятия пробирку с образцом медленно переворачивают 8-10 раз для перемешивония крови с антикоагулянтом. Хранение и транспортировка строго при 18–23°С в вертикальном положении не более 24 ч.

Невыполнение этих условий приводит к некорректным результатам.

Интерпретация результатов

Т-лимфоциты (CD3+ клетки). Повышенное количество свидетельствует о гиперактивности иммунитета, наблюдается при острых и хронических лимфолейкозах. Увеличение относительного показателя встречается при некоторых вырусных и бактериальных инфекциях в начале заболевания, обострениях хронических заболеваний.

Снижение абсолютного количества Т-лимфоцитов свидетельствует о недостаточности клеточного иммунитета, а именно о недостаточности клеточно-эффекторного звена иммунитета. Выявляется при воспалениях разнообразной этиологии, злокачественных новообразованиях, после травмы, операций, инфаркта, при курении, приеме цитостатиков. Повышение их числа в динамике заболевания – клинически благоприятный признак.

В-лимфоциты (CD19+ клетки) Снижение наблюдается при физиологических и врожденных гипогаммаглобулинемиях и агаммаглобулинемиях, при новообразованиях иммунной системы, лечении иммунодепрессантами, острой вирусной и хронической бактериальной инфекциях, состоянии после удаления селезенки.

NK-лимфоциты с фенотипом CD3-CD16++56+ Натуральные киллеры (NK-клетки) – популяция больших гранулярных лимфоцитов. Они способны лизировать клетки-мишени, инфицированные вирусами и другими внутриклеточными антигенами, опухолевые клетки, а также другие клетки аллогенного и ксеногенного происхождения.

Увеличение количества NK-клеток связано с активацией антитрансплантационного иммунитета, в некоторых случаях отмечается при бронхиальной астме, встречается при вирусных заболеваниях, повышается при злокачественных новообразованиях и лейкозах, в периоде реконвалесценции.

Т-лимфоциты хелперы с фенотипом CD3+CD4+ Увеличение абсолютного и относительного количества наблюдается при аутоиммунных заболеваниях, может быть при аллергических реакциях, некоторых инфекционных заболеваниях. Это увеличение свидетельствует о стимуляции иммунной системы на антиген и служит подтверждением гиперреактивных синдромов.

Снижение абсолютного и относительного количества Т-клеток свидетельствует о гипореактивном синдроме с нарушением регуляторного звена иммунитета, является патогномичным признаком для ВИЧ-инфекции; встречается при хронических заболеваниях (бронхитах, пневмониях и т.д.), солидных опухолях.

Т-цитотоксические лимфоциты с фенотипом CD3+ CD8+ Повышение выявляется практически при всех хронических инфекциях, вирусных, бактериальных, протозойных инфекциях. Является характерным для ВИЧ-инфекции. Снижение наблюдается при вирусных гепатитах, герпесе, аутоиммунных заболеваниях.

Соотношение CD4+/CD8+ Исследование соотношения CD4+/CD8+ (CD3, CD4, CD8, CD4/CD8) рекомендовано только для мониторинга ВИЧ-инфекции и контроля эффективности АРВ терапии. Позволяет определить абсолютное и относительное количество Т-лимфоцитов, субпопуляций Т-хелперов, ЦТЛ и их соотношение.

Диапазон значений – 1,2–2,6. Снижение наблюдается при врожденных иммунодефицитах (синдром Ди-Джоржи, Незелофа, Вискотта-Олдрича), при вирусных и бактериальных инфекциях, хронических процессах, воздействии радиации и токсических химических веществ, множественной миеломе, стрессе, снижается с возрастом, при эндокринных заболеваниях, солидных опухолях. Является патогномичным признаком для ВИЧ-инфекции (менее 0,7).

Увеличение значения более 3 – при аутоиммунных заболеваниях, остром Т-лимфобластном лейкозе, тимоме, хроническом Т-лейкозе.

Изменение соотношения может быть связано с количеством хелперов и ЦТЛ у данного пациента. Например, снижение количества CD4+ Т-клеток при острой пневмонии в начале заболевания ведет к снижению индекса, а ЦТЛ при этом могут не измениться.

Для дополнительного исследования и выявления изменений иммунной системы при патологиях требующих оценки наличия острого или хронического воспалительного процесса и степени его активности, рекомендуется включать подсчет количества активированных Т-лимфоцитов с фенотипом CD3+HLA-DR+ и ТNK–клеток с фенотипом CD3+CD16++56+.

Т-активированные лимфоциты с фенотипом CD3+HLA-DR+ Маркер поздней активации, показатель гиперреактивности иммунитета. По экспрессии данного маркера можно судить о выраженности и силе иммунного ответа. Появляется на Т-лимфоцитах после 3-го дня острого заболевания. При благоприятном течении заболевания снижается до нормы. Увеличение экспрессии на Т-лимфоцитах может быть при многих заболеваниях, связанных с хроническим воспалением. Отмечено его повышение у пациентов с гепатитом С, пневмониями, ВИЧ-инфекцией, солидными опухолями, аутоиммунными заболеваниями.

ТNK-лимфоциты с фенотипом CD3+CD16++CD56+ Т-лимфоциты, несущие на своей поверхности маркеры CD16++ CD 56+. Эти клетки имеют свойства как Т-, так и NK-клеток. Исследование рекомендовано как дополнительный маркер при острых и хронических заболеваниях.

Снижение их в периферической крови может наблюдаться при различных органоспецифических заболеваниях и системных аутоиммунных процессах. Увеличение отмечено при воспалительных заболеваниях разной этиологии, опухолевых процессах.

Исследование ранних и поздних маркеров активации Т-лимфоцитов (CD3+CD25+, CD3-CD56+, CD95, CD8+CD38+) дополнительно назначают для оценки изменений ИС при острых и хронических заболеваниях, для диагностики, прогноза, мониторинга течения заболевания и проводимой терапии.

Т-активированные лимфоциты с фенотипом CD3+CD25+, рецeптор к ИЛ2 CD25+ – маркер ранней активации. О функциональном состоянии Т-лимфоцитов (CD3+) свидетельствует количество экспрессирующих рецепторов к ИЛ2 (CD25+). При гиперактивных синдромах количество этих клеток возрастает (острые и хронические лимфолейкозы, тимома, отторжение трансплантата), кроме того, повышение их может свидетельствовать о ранней стадии воспалительного процесса. В периферической крови их можно выявить в первые три дня болезни. Снижение числа этих клеток может наблюдаться при врожденных иммунодефицитах, аутоиммунных процессах, ВИЧ-инфекции, грибковых и бактериальных инфекциях, ионизирующей радиации, старении, отравлении тяжелыми металлами.

Т-цитотоксические лимфоциты с фенотипом CD8+CD38+ Присутствие CD38+ на ЦТЛ лимфоцитах отмечено у пациентов с разными заболеваниями. Информативный показатель при ВИЧ-инфекции, ожоговой болезни. Увеличение числа ЦТЛ с фенотипом CD8+CD38+ наблюдается при хронических воспалительных процессах, онкологических и некоторых эндокринных заболеваниях. При проведении терапии показатель снижается.

Субпопуляция натуральных киллеров с фенотипом CD3- CD56+ Молекула CD56 – адгезивная молекула, широко представленная в нервной ткани. Кроме натуральных киллеров, экспрессируется на многих типах клеток, в том число на Т-лимфоцитах.

Увеличение данного показателя свидетельствуют о расширении активности специфического клона клеток киллеров, которые имеют меньшую цитолитическую активность, чем NK-клетки с фенотипом CD3- CD16+. Количество этой популяции возрастает при гематологических опухолях (ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, плазмоклеточная миелома, апластическая крупноклеточная лимфома), хронических заболеваниях, некоторых вырусных инфекциях.

Снижение отмечается при первичных иммунодефицитах, вирусных инфекциях, системных хронических заболеваниях, стрессе, лечении цитостатиками и кортикостероидами.

Рецептор CD95+ – один из рецепторов апоптоза. Апоптоз – сложный биологический процесс, необходимый для удаления из организма поврежденных, старых и инфицированных клеток. Рецептор CD95 экспрессируется на всех клетках иммунной системы. Он играет важную роль в контроле функционирования иммунной системы, так как является одним из рецепторов апоптоза. Его экспрессия на клетках определяет готовность клеток к апоптозу.

Снижение доли CD95+-лимфоцитов в крови пациентов свидетельствует о нарушении эффективности последнего этапа выбраковки дефектных и инфицированных собственных клеток, что может привести к рецидиву заболевания, хронизации патологического процесса, развитию аутоиммунных заболеваний и повышению вероятности опухолевой трансформации (к примеру, рака шейки матки при папилломотозной инфекции). Определение экспрессии CD95 имеет прогностическое значение при миело- и лимфопролифератиных заболеваниях.

Повышение интенсивности апоптоза наблюдается при вирусных заболеваниях, септических состояниях, при употреблении наркотических средств.

Активированные лимфоциты CD3+CDHLA-DR+, CD8+CD38+, CD3+CD25+, CD95. Тест отражает функциональное состояние Т-лимфоцитов и рекомендован для контроля за течением заболевания и контроля иммунотерапии при воспалительных заболеваниях разной этиологии.